轉用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調到。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。根瘤菌培養基葡萄糖10g，磷酸氫二鉀，碳酸鈣3g，硫酸鎂，酵母粉，水1000ml，1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養基淀粉硝酸鹽培養基（高氏一號培養基）可溶性淀粉，硝酸鉀，磷酸氫二鉀，氯化鈉，硫酸鎂，硫酸亞鐵，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補足失水。調整pH值到，分裝后滅菌，備用。面粉瓊脂培養基面粉60g，瓊脂20g，水1000ml把面粉用水調成糊狀，加水到500ml，放在文火上煮30分鐘。另取500ml水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調勻，補充水分，調整pH值到，分裝，滅菌，備用。微藻培養基BG-11培養基NaNO3，K2HPO4·，MgSO4·，CaCl2·CitricAcid（檸檬酸），Ferricammoniumcitrate（檸檬酸鐵銨，EDTA(dinatrium-salt)，Na2CO3，A5+Cosolution*（A5溶液1000×）1mlDistilledWater。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進行配制外。靜安區生態即用型培養基基地

    應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發而丟失的水分，**后必須加以補足。培養基pH的初步調整培養基各成分完全溶解后，應進行pH的初步調正，因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低。而腸浸液pH卻會有***的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的**終pH，保證培養基的質量。pH調正后，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉淀物的析出。培養基注意事項編輯語音培養基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項：確認工作細胞庫是否被污染，確認毒種工作種子批是否被污染，確認所用培養基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用細菌、***及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養基的靈敏度進行驗證。實際生產中，可以從配制好的培養液中取少量加入營養瓊脂于恒溫培養箱內培養，48小時即可觀察有無污染。其它：高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證，確保滅菌和除菌效果。松江區質量即用型培養基排名靠前記錄其來源。培養基的制備記錄每次制備培養基均應有記錄。

    且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機物等，這些物質對促進細胞生長或***生長活性是達到生理平衡的。血清主要作用1．提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。2．提供***和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質***（氫化可的松、**）、類固醇***（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3．提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及***等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。4．提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。5．對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發現的，則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被***用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時，粘度起到重要作用。

    兼性厭氧微生物在F值為+，在+。F值與氧分壓和pH有關，也受某些微生物代謝產物的影響。在pH相對穩定的條件下，可通過增加通氣量（如振蕩培養、攪拌）提高培養基的氧分壓，或加入氧化劑，從而增加F值；在培養基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質可降低F值。5、原料來源的選擇在配制培養基時應盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養基成分，特別是在發酵工業中，培養基用量很大，利用低成本的原料更體現出其經濟價值。例如，在微生物單細胞蛋白的工業生產過程中，常常利用糖蜜（制糖工業中含有蔗糖的廢液）、乳清（乳制品工業中含有乳糖的廢液）、豆制品工業廢液及黑廢液（造紙工業中含有戊糖和己糖的亞硫酸紙漿）等都可作為培養基的原料。再如，工業上的甲烷發酵主要利用廢水、廢渣作原料，而在我國農村，已推廣利用人畜糞便及禾草為原料發酵生產甲烷作為燃料。另外，大量的農副產品或制品，如鼓皮、米糠、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅、蛋白胨等都是常用的發酵工業原料。6、滅菌處理要獲得微生物純培養，必須避免雜菌污染，因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養基而言，更是要進行嚴格的滅菌。培養基成分的稱取培養基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂。

    二、培養基培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調pH至，若pH值超過，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。四、***素為防止培養時期細菌的污染，可在培養基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA***的細胞數隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。完全稱取完畢后，還應進行一次檢查。閔行區常規即用型培養基服務保障

培養基制備基本方法編輯語音培養基配方的選定同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。靜安區生態即用型培養基基地

    培養基化學分類編輯語音培養基天然培養基天然培養基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。例如。牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基和LB培養基等。常用的天然有機營養物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養基成本較低，除在實驗室經常使用外，也適于用來進行工業上大規模的微生物發酵生產。固體培養基培養基組合培養基合成培養基是根據天然培養基的成分，用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養基。例如，高氏1號培養基和查氏培養基等。合成培養基有一定的配方，配制合成培養基時重復性強，但與天然培養基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。[2]培養基半組合培養基指一類主要以化學試劑配制，同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如，馬鈴薯蔗糖培養基。培養基物理分類編輯語音培養基液體培養基80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的營養成分的培養基。培養基固體培養基一類配制成的固體狀態的基質。根據性質又分為固化培養基、非可逆性固化培養基、天然固態培養基、濾膜。靜安區生態即用型培養基基地

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