血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝***中起重要作用，如SeO3、硒等。血清培養基主要問題1．血清的成份可能有幾百種之多，對其準確的成份、含量及其作用機制不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難。2．血清都是批量生產，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性極為困難，從而使實驗的標準化和連續性受到限制。3．對大多數細胞，在體內狀態，血清不是它們接觸的生理學液體，只是在損傷愈合以及血液凝固過程中才接觸血清，因此使用血清有可能改變某種細胞在體內的正常狀態，血清可能促進某些細胞的生長（成纖維細胞）同時***另一類細胞生長（表皮細胞）。4．血清含一些對細胞產生毒性的物質，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌***等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。5．動物個體不同，血清產地、批號不同，每批質量差異甚大，其成分不能保持一致。6．取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產生潛在影響，可能導致實驗失敗或實驗結果不可靠性。7．大規模生產中，血清來源越來越困難。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。黃浦區推廣臨床微生物檢驗培養基銷售價格

    轉用文火燉2小時。過濾，濾出的肉末干燥處理，濾液pH值調到。每支試管內加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心，滅菌，備用。根瘤菌培養基葡萄糖10g，磷酸氫二鉀，碳酸鈣3g，硫酸鎂，酵母粉，水1000ml，1%結晶紫溶液1ml。先把瓊脂加水煮沸溶解，然后分別加入其他組分，攪拌使溶解后，分裝，滅菌，備用。放線菌培養基淀粉硝酸鹽培養基（高氏一號培養基）可溶性淀粉，硝酸鉀，磷酸氫二鉀，氯化鈉，硫酸鎂，硫酸亞鐵，瓊脂2g，水100ml。先把淀粉放在燒杯里，用5ml水調成糊狀后，倒入95ml水，攪勻后加入其他藥品，使它溶解。在燒杯外做好記號，加熱到煮沸時加入瓊脂，不停攪拌，待瓊脂完全溶解后，補足失水。調整pH值到，分裝后滅菌，備用。面粉瓊脂培養基面粉60g，瓊脂20g，水1000ml把面粉用水調成糊狀，加水到500ml，放在文火上煮30分鐘。另取500ml水，放入瓊脂，加熱煮沸到溶解后，把兩液調勻，補充水分，調整pH值到，分裝，滅菌，備用。微藻培養基BG-11培養基NaNO3，K2HPO4·，MgSO4·，CaCl2·CitricAcid（檸檬酸），Ferricammoniumcitrate（檸檬酸鐵銨，EDTA(dinatrium-salt)，Na2CO3，A5+Cosolution*（A5溶液1000×）1mlDistilledWater。黃浦區專注臨床微生物檢驗培養基服務保障用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內。

    調整pH值到6。分裝，滅菌，備用。該培養基用于培養和保存靈芝、平菇、香菇等食用菌菌種。***的培養基在植物組織培養時，通過調節IAA和CTK的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。CTK/IAA高時，愈傷組織分化芽。CTK/IAA低時，分化根；CTK/IAA比例適中維持愈傷組織不分化。愈傷組織誘導培養基制備以MS培養基母液為基礎，向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，鐵鹽100×母液20mL，維生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培養基后，再加入·L-1的BA8mL，·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養基體積約2/3-3/4的蒸餾水，加入40g蔗糖后攪拌使其溶化，用·L-1的NaOH和mol·L-1的HCl調整pH值至。加入14g瓊脂，將鋁鍋置于電爐上，攪拌加熱使瓊脂完全溶化，然后用蒸餾水定容至終體積2L，繼續加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。******葉片愈傷組織誘導取一無菌培養皿，用解剖刀切取1-2片無菌苗葉片置于無菌培養皿中，并用解剖刀將葉片切成2mm2左右的小片，然后將其接種于準備好的培養基上，每瓶接種5小片，一共接種6瓶。接種后的三角平置于24條件下黑暗培養1周。

    對培養基一般采取高壓蒸汽滅菌，一般培養基用，℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中，長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞，如使糖類物質形成氨基糖、焦糖，因此含糖培養基常在，℃15-30分鐘進行滅菌，某些對糖類要求較高的培養基，可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌，再與其他已滅菌的成分混合；長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子（特別是鈣、鎂、鐵離子）結合形成難溶性復合物而產生沉淀，因此，在配制用于觀察和定量測定微生物生長狀況的合成培養基時，常需在培養基中加入少量螯合劑，避免培養基中產生沉淀，常用的螯合劑為乙二胺四乙酸（EDTA）。還可以將含鈣、鎂、鐵等離子的成分與磷酸鹽、碳酸鹽分別進行滅菌，然后再混合，避免形成沉淀；高壓蒸汽滅菌后，培養基pH會發生改變（一般使pH降低），可根據所培養微生物的要求，在培養基滅菌前后加以調整。在配制培養基過程中，泡沫的存在對滅菌處理極不利，因為泡沫中的空氣形成隔熱層，使泡沫中微生物難以被殺死。因而有時需要在培養基中加入消泡沫劑以減少泡沫的產生，或適當提高滅菌溫度。血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。

    價格昂貴，是構成動物細胞培養對生產成本的主要部分之一。血清的質量標準血清質量高低取決于兩方面因素：一是取材對象，二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內，取材過程應嚴格按照操作規程執行，制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定。WHO公布的《用動物細胞體外培養生產生物制品規程》中的要求：1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。2．有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。3．證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的***物。4．血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。5．無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細菌噬菌體污染。6．對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物制品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量，細菌、***、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內***，支持細胞增殖檢查。培養基培養基配制編輯語音一、配制用水培養基的大部分是水，所以水的質量直接影響培養基的質量。按Waymouth標準，水的電阻應為200萬歐姆，一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。1．牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。靜安區介紹臨床微生物檢驗培養基銷售價格

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    二、培養基培養基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基，以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）調pH至，若pH值超過，則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌，使用前需經滅菌μm孔徑濾膜濾過處理。三、血清培養中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高壓滅菌，無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體，置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養細胞種類、時間而定，一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制，可選用無血清培養基。四、***素為防止培養時期細菌的污染，可在培養基中添加適當***素，一般用量與組織細胞培養相同：卡那霉素100單位/毫升，或雙抗--青霉素100單位/毫升，鏈霉素100微克/毫升。五、植物血凝素（PHA）非增殖期的細胞不能制備染色體，如人外周血淋巴細胞，但在離體培養過程中，在PHA的作用下，可被刺激轉化為淋巴母細胞而進入有絲分裂。經實驗測定其分裂高峰分別于培養后44-48小時和68-72小時。PHA有粘多糖，蛋白質兩種重要成分。粘多糖促使有絲分裂，蛋白質起凝集作用。PHA***的細胞數隨其濃度而增加，直至全部免疫活性細胞均被***為止，但PHA濃度過高會引起凝集，一般采用4%濃度為好。黃浦區推廣臨床微生物檢驗培養基銷售價格

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