分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域 ,還是在化工、醫藥、環境檢測、冶金等現***產與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有***而重要的應用。分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
由于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生。超微量分光光度計近年來已經替換普通的分光光度計成為分子生物學實驗室的新寵,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質組學和基因組學等領域。
超微量分光光度計已成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
分光光度計是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。重慶高靈敏度超微量分光光度計試用
朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據的基本原理。當一束單色光(指路由一種顏色的光)通過一均勻的溶液時,一部分被吸收,一部分透過。
朗伯比爾定律:A = abc
其意義為:當一束單色光通過一均勻溶液時,溶液對單色光的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。
A =abc 中,吸光系數a,表征吸光物質的 靈敏度。a值越大,靈敏度越高。如果濃度的單位為物質的量濃度(單位為:mol/L),則吸光系數a可以寫成ε ,ε稱為摩爾吸光系數。
由上式可知,當溶液層厚度b和吸光系數a固定時,吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定比較大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,這是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件。
廣東全光譜波長超微量分光光度計樣品檢測每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein BCA檢測類型:
BCA是一種通過比色來檢測非純蛋白的濃度的方法,它通常用于稀釋的蛋白濃度檢測,以及那些在紫外區域含有吸收光雜質的蛋白的濃度檢測。BCA法需要在蛋白定量前構建一個標準曲線。
BCA法是檢測Cu+1離子的方法,在堿性環境下,Cu+2離子會被蛋白還原為Cu+1離子。兩個聯喹啉二羧酸BCA分子和一個Cu+1離子會形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情況下,以750nm波長的吸光值為基線,Cu-BCA形成的螯合物在562nm處有比較大吸光值。
常規檢測使用試劑/蛋白樣品的體積比為20:1,檢測濃度范圍為0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA)。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和80μlBCA試劑。
微量檢測使用試劑/樣品的體積比為1:1,可以檢測蛋白濃度范圍從0.01mg/ml至0.20mg/ml。要準備足夠的樣品來做基座檢測,建議使用10μl樣品和10μlBCA試劑(使用PCR管)。
按照試劑盒生產廠家的說明來準備標準品和構建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環境溫度一致。
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein Pierce 660nm檢測方式:
Protein Pierce 660nm主要用來定量檢測那些含有還原劑或者去污劑的總蛋白濃度,使用的的試劑/樣品體積比例為15:1。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和60μl試劑。
按照試劑盒生產廠家的說明來準備標準品和和構建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環境溫度一致??梢詮脑噭┖猩a廠家購買用于構建標準曲線的蛋白標準品(BSA)。
當使用4μl樣品和60μl試劑時,Pierce 660nm可以檢測的濃度范圍為50ug/ml到125ug/ml。
不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系極強,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。
Micro Drop為一款全光譜波長超微量分光光度計。云南雙檢測模式超微量分光光度計核酸檢測
A260/A280:是核酸純度的指示值。重慶高靈敏度超微量分光光度計試用
分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為:
(1)可見光分光光度計:用來測量待測物質對可見光(400~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細菌細胞密度。
(2)紫外分光光度計:紫外可見分光光度計用來測量待測物質對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器??梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。
(3)紅外分光光度計:一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物**常用的光譜區域,能分析各種狀態(氣、液、固)的試樣。
(4)熒光分光光度計:熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域。
(5)原子吸收分光光度計:該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規儀器之一。是材料分析及質量控制部門進行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
現今生命科學領域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。
重慶高靈敏度超微量分光光度計試用
上海寶予德科學儀器有限公司是以提供移液器,吸頭,酶標儀,分光光度計內的多項綜合服務,為消費者多方位提供移液器,吸頭,酶標儀,分光光度計,公司位于上海市松江區新橋鎮莘磚公路258號40幢201室-1,成立于2013-12-19,迄今已經成長為醫藥健康行業內同類型企業的佼佼者。公司主要提供儀器儀表(除計量)、實驗室設備(除特種)的生產、銷售,科學儀器領域內的技術開發、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,從事貨物及技術的進出口業務,自有房屋租賃。移液器,移液耗材,酶標儀,超微量分光光度計,核酸提取儀,研磨儀,混勻儀等領域內的業務,產品滿意,服務可高,能夠滿足多方位人群或公司的需要。寶予德將以精良的技術、優異的產品性能和完善的售后服務,滿足國內外廣大客戶的需求。