熒光酶標儀是用來進行熒光的檢測.通過激發光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質標定的樣品上后,會發出波長更長的發射光,通過發射光柵后到達檢測器。熒光的強度與樣品的濃度呈一定的比例。熒光檢測靈敏度高,可實時檢測,使用方便,檢測模式多樣,但是容易受外界干擾,激發光與發射光容易互相影響,干擾檢測。
化學發光是來自生物化學反應中的自發光,可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發光持久,穩定,能持續一段時間;閃光型發光時間短,變化快,穩定性不強,需要應用自動加樣器才可以進行。化學發光中發出的光子數與樣品量呈一定比例關系,化學發光酶標儀靈敏度非常高,動力學范圍廣。
酶標儀內置濾光片輪,可選擇試驗所需的不同波長的濾光片來進行分光。廣東酶標儀檢驗
如何測定的吸光度范圍?
通常,酶標儀的吸光度測定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間,但現在基本上都做了拓寬,可達到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。
對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內的線性和精密度如何。
酶標儀的光學系統采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現出來。光學系統好的話,則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
浙江多功能酶標儀波長范圍廣酶標儀比較廣用于醫院、血站、防疫站、生物制品等部門。
選擇酶標儀的檢測波長:
405nm:ELISA檢測,底物是PNPP;
405-420:ELISA檢測,底物是ABTS;
450nm:
1. 科研應用:
細胞增殖檢測CCK-8;ELISA檢測,底物是TMB;
ELISA檢測,底物是OPD(pH5.0,OPD比較**長450;pH1.0,OPD比較**長492);
2. 醫療應用:
丙肝、乙肝檢測;HIV檢測;甲胎蛋白的測定AFP(肺免疫學檢測);CA15-3(乳腺的測定);單純皰病毒的檢測等等。
3. 農業檢測:
動物疫病檢測,禽類疫病檢測;
4. 食品與環境安全:
檢測,獸藥殘留檢測,添加劑檢測,檢測。
490nm:細胞增殖檢測MTT;
540nm:一氧化氮(NO)檢測;
562nm:蛋白質濃度測定(BCA);
595nm:蛋白質濃度測定(考馬斯亮藍染色);
濾光片是酶標儀中重要的光學元件,它的作用是根據不同的波長選擇性地透過或反射光線,從而實現對樣品信號的分離和增強。濾光片可以分為干涉濾光片和吸收濾光片兩種,前者是利用多層薄膜之間的干涉效應來實現波長選擇,后者是利用染料或金屬等材料對特定波長的吸收來實現波長選擇。干涉濾光片具有透過率高、帶寬窄、溫度穩定性好等優點,是目前酶標儀中常用的濾光片類型。
酶標儀中常用的濾光片有三種:激發濾光片、發射濾光片和參考濾光片。激發濾光片位于光源和樣品之間,用于選擇合適的激發波長來激發樣品發出熒光或化學發光。發射濾光片位于樣品和探測器之間,用于選擇合適的發射波長來檢測樣品發出的熒光或化學發光。參考濾光片位于參考探測器前面,用于消除環境因素對檢測結果的影響,提高檢測精度。
國內多家機構,如衛生部臨床檢驗中心和計劃生育系統等多次強調酶標儀的重要性。
酶標儀的使用:
1. 準備工作:在使用酶標儀之前,需要將儀器進行預熱,并根據實驗需要選擇合適的濾光片。同時,需要將標準曲線和待測樣品的反應體系準備好。
2. 測量吸光度:將標準曲線和待測樣品分別加入反應體系中,然后將反應體系放入酶標儀中進行測量。在測量過程中,需要選擇合適的波長和濾光片,并設置好空白對照組。
3. 計算結果:根據測量結果,可以計算出待測樣品中物質的含量。具體計算方法如下:
(1)根據標準曲線計算出各個標準品的吸光度值和物質含量。
(2)根據待測樣品的吸光度值和標準曲線計算出待測樣品中物質的含量。
(3)根據實驗需要進行數據處理和統計分析。
光吸收的檢測技術成熟,成本低,操作簡單。山西酶標儀檢驗
酶標儀常用波長為:405nm,450nm,490nm與630nm。廣東酶標儀檢驗
寶予德K3 Plus酶標儀測量參數:
1. 單波長檢測:在一個波長下測量吸光度(也稱為終點法)。
2. 雙波長檢測:用兩個波長測量吸光度,**終結果為***次的測量結果減去第二次測量的結果。
3. 雙時法檢測:在兩個不同的時間點測量板的吸光度。**終結果為第二次測量的結果減去***次測量的結果。
4. 動力學檢測:測量吸光度變化率。
5. 多波長檢測:每一列的吸光值用各自不同的波長檢測。只在基礎酶聯程序中可用。
K3 Plus酶標儀**于測量通過微孔板的吸光度值,采用8通道垂直檢測光路光密度檢測理念,**多可同時配置8塊濾光片,波長范圍400~750nm,儀器性能穩定,更大的彩色液晶觸摸屏,可視用戶界面,簡單易用,在各種科研應用中具有出色的靈活性。
廣東酶標儀檢驗
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