光譜儀和分光光度計有什么區別?
使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強度來進行定量分析的儀器叫做分光光度計。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因為中國上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計進行了國產化,當時的技術難點也就在分光技術上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計直接稱作分光光度計,所以分光光度計也特指紫外可見分光光度計。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實也是要有分光組件的,現在都是用光譜儀這個名詞來統稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計范圍要大一些,新一些。而分光光度計更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計因為它們在一般性的分析工作中也主要是用來定量的,這就造成了“分光光度計”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。陜西高重復性超微量分光光度計樣品檢測
包括波長范圍為400~760 nm的可見光區和波長范圍為200~400 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400~760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
氫燈(或氘燈)的發射光譜:氫燈能發出185~400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源。
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福建全光譜波長超微量分光光度計價格優惠測試在紫外區有吸收的樣品時用石英比色皿。
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系極強,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。
Bradford法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。
Micro Drop比色皿檢測基本操作:
1. 準備好兩個比色皿,一個加入空白檢測液,一個加入樣品,保證加入的液體量足夠,能蓋過光束,光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請按照比色皿生產廠家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂,把比色皿插入到儀器中,插入比色皿時要注意透光面,與儀器上面的光路指向的方向相對應。
3. 在做比色皿檢測時樣品臂必須放下來。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項”框中選擇“使用比色皿”, 插入比色皿,勾選基線校正,設置相應參數進行空白檢測及檢測。
5. 當檢測完成后,移出比色皿,倒出樣品,清洗干凈比色皿。
使用分光棱鏡或者光柵產生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強度來進行分析的儀器叫做分光光度計。
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein & Labels檢測類型:
Protein & Labels可以用來檢測蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標記物)。它還可通過吸光值的比值來檢測金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準確檢測100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質,在檢測方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測樣品的類型,默認的設定為1 Abs=1mg/ml。
4. 選擇濃度單位,默認的單位是mg/ml。
5. 使用下拉菜單來選擇染料,默認的染料1為Cy3,染料2為Cy5。
6. 可以選擇基線校正,默認的校準波長為340nm,也可以重新輸入一個校準波長。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結果。
8. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對照,空白對照液體能夠溶解目標溶液。空白對照液體的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣。
A230是碳水化合物較高吸收峰的吸收波長。四川操作簡便超微量分光光度計探針檢測
朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據的基本原理。陜西高重復性超微量分光光度計樣品檢測
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應為基礎,并有所改進。蛋白質與Cu2+反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質的蛋白不適合此種方法。
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