寶予德超微量分光光度計使用時注意小貼士:
(1)測量前將樣品中度混勻(可采用震蕩器或用手指彈震管底)
(2)移液器吸頭插入液面下吸取樣品,可避免吸入氣泡;TIP頭貼著下光纖表面打出樣品,且只按到移液器***擋盡頭,第二擋不要按,可以避免吹出氣泡到樣品中。
(3)每次測量完畢后,用蒸餾水清潔上下光纖端面,這樣可以更好地保證下一次測量的準確性(主要針對超高濃度樣品,一般樣品無此要求)。
(4)每次做空白檢測前一定要先用水清潔上下光纖表面,可保證空白檢測準確。
(5)每次測量的核酸樣品量建議為1-2微升,蛋白樣品建議2微升。 過少可能無法形成水柱,過多可能溢出。
(6)加樣后盡快測量,以防蒸發濃縮以及灰塵落入,已加樣品不能多次檢測,如需重測需重新滴加同一樣品。
(7)儀器避免陽光直射,避免強風吹拂,以避免蒸發。
(8)連續測量一段時間后擦凈樣品,用水清潔上下光纖表面,然后用水或緩沖液進行重新空白后再檢測。
(9)清潔光纖端面(上樣基座)時必須用潔凈質軟的實驗室用紙(擦鏡紙等)進行輕輕擦拭。
測試在紫外區有吸收的樣品時用石英比色皿。天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein BCA檢測類型:
BCA是一種通過比色來檢測非純蛋白的濃度的方法,它通常用于稀釋的蛋白濃度檢測,以及那些在紫外區域含有吸收光雜質的蛋白的濃度檢測。BCA法需要在蛋白定量前構建一個標準曲線。
BCA法是檢測Cu+1離子的方法,在堿性環境下,Cu+2離子會被蛋白還原為Cu+1離子。兩個聯喹啉二羧酸BCA分子和一個Cu+1離子會形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情況下,以750nm波長的吸光值為基線,Cu-BCA形成的螯合物在562nm處有比較大吸光值。
常規檢測使用試劑/蛋白樣品的體積比為20:1,檢測濃度范圍為0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA)。當使用基座檢測時,推薦使用4μl樣品和80μlBCA試劑。
微量檢測使用試劑/樣品的體積比為1:1,可以檢測蛋白濃度范圍從0.01mg/ml至0.20mg/ml。要準備足夠的樣品來做基座檢測,建議使用10μl樣品和10μlBCA試劑(使用PCR管)。
按照試劑盒生產廠家的說明來準備標準品和構建標準曲線。確保在所有檢測過程中,每個樣品的處理時間及環境溫度一致。
山東超微量分光光度計試用MicroDrop可連接電腦/平板電腦,實現本地一指控制;WiFi無線連接功能,節省時間和空間。
分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域 ,還是在化工、醫藥、環境檢測、冶金等現***產與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有***而重要的應用。分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
由于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量樣本量很小,于是超微量分光光度計應運而生。超微量分光光度計近年來已經替換普通的分光光度計成為分子生物學實驗室的新寵,廣泛應用于生命科學實驗室蛋白質組學和基因組學等領域。
超微量分光光度計已成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
測試在紫外區有吸收的樣品時用石英比色皿,測試只在可見光區有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。石英比色皿在可見和紫外光區沒有吸收,而玻璃比色皿在紫外區有吸收,所以不能用于紫外光區。對于一般的非光學專業人員,用眼睛是不能分開的兩種比色皿的。但是兩者硬度差別很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)幾十倍,如果把兩個對磨,石英比色皿將很少被磨損,而玻璃比色皿磨損非常大。由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,***的譜段范圍內沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有許多離子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿優越的多,化驗數據更準確、更可靠。
BCA法的原理是蛋白在堿性溶液里與Cu2+形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein & Labels檢測類型:
Protein & Labels可以用來檢測蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標記物)。它還可通過吸光值的比值來檢測金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準確檢測100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質,在檢測方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測樣品的類型,默認的設定為1 Abs=1mg/ml。
4. 選擇濃度單位,默認的單位是mg/ml。
5. 使用下拉菜單來選擇染料,默認的染料1為Cy3,染料2為Cy5。
6. 可以選擇基線校正,默認的校準波長為340nm,也可以重新輸入一個校準波長。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結果。
8. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對照,空白對照液體能夠溶解目標溶液。空白對照液體的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣。
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。北京高靈敏度超微量分光光度計紫外檢測
不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
朗伯一比爾(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依據的基本原理。當一束單色光(指路由一種顏色的光)通過一均勻的溶液時,一部分被吸收,一部分透過。
朗伯比爾定律:A = abc
其意義為:當一束單色光通過一均勻溶液時,溶液對單色光的吸光度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。
A =abc 中,吸光系數a,表征吸光物質的 靈敏度。a值越大,靈敏度越高。如果濃度的單位為物質的量濃度(單位為:mol/L),則吸光系數a可以寫成ε ,ε稱為摩爾吸光系數。
由上式可知,當溶液層厚度b和吸光系數a固定時,吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時,首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況(吸收光譜),從中確定比較大吸收波長 ,然后以此波長 的光為光源(單色光),進行吸光度A的測定,這是朗伯比爾定律用于定量分析的首要條件。
天津全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
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