分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：(1)200～380nm的紫外光區(qū)，(2)380～780nm的可見光區(qū)，(3)2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度，所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進行校正檢定。MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自動調(diào)整。河北超微量超微量分光光度計菌液檢測
傳統(tǒng)分光光度計：
樣品體積要求大，絕大部分要50μL以上；
需使用比色皿，每次換樣品時，比色杯需要清洗，工作繁重；
光程一般為10mm，樣品需要稀釋，測量濃度范圍??；
燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成，壽命短；
需要預(yù)熱半個小時以上；
顯示吸光度值，不顯示濃度值；
儀器體積大，質(zhì)量重；
超微量分光光度計；
所需樣品體積小，*需1～2μL；
不需要比色皿，用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上；
具有多個光程(電機控制自動選擇光程)，樣品無需稀釋，測量范圍可達到常規(guī)分光光度計的50倍；
氙氣閃光燈為燈源，壽命長,性能穩(wěn)定；
不需要預(yù)熱，可隨時檢測；
顯示吸光度值的同時，程序直接給出濃度值（核酸、蛋白和熒光染料）。
天津性價比高超微量分光光度計蛋白檢測分光光度計是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。
Micro Drop比色皿檢測基本操作：
1. 準備好兩個比色皿，一個加入空白檢測液，一個加入樣品，保證加入的液體量足夠，能蓋過光束，光束（2mm寬）位置在比色皿底部以上8.5mm的位置，請按照比色皿生產(chǎn)廠家的建議加入液體。
2. 抬起樣品臂，把比色皿插入到儀器中，插入比色皿時要注意透光面，與儀器上面的光路指向的方向相對應(yīng)。
3. 在做比色皿檢測時樣品臂必須放下來。
4. 在Micro Drop軟件上的“選項”框中選擇“使用比色皿”， 插入比色皿，勾選基線校正，設(shè)置相應(yīng)參數(shù)進行空白檢測及檢測。
5. 當檢測完成后，移出比色皿，倒出樣品，清洗干凈比色皿。
Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。當使用微量，半微量或者超微量的比色皿時，我們建議使用周邊不透明的比色皿，不透明的比色皿保證了光穿過樣本后全部到達檢測器。而透明的比色皿會讓那些沒有透過樣本的光也到達檢測器，這樣會導(dǎo)致樣品（特別是低濃度樣品）的檢測不準確。
當檢測的波長為紫外區(qū)域時（<340nm），要使用石英比色皿，這樣才能透過紫外光。雖然有一些制造商提供紫外透過的一次性塑料比色皿，但是即使質(zhì)量比較好的塑料比色皿也不能讓低于220nm以下波長的紫外光透過，而大部分玻璃和塑料比色皿是完全紫外非透過性的。
一般單光束的分光光度計都會推薦相配的比色皿，而許多比色皿生產(chǎn)廠家都有嚴格的質(zhì)控來保證比色皿的性能而不用在換比色皿時需要校準，這些比色皿都可以用在本產(chǎn)品上。
BCA法的原理是蛋白在堿性溶液里與Cu2+形成紫色化合物，吸收峰在562nm波長。
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式：
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度；
I0為入射的單色光強度；
I 為透射的單色光強度；
T 為物質(zhì)的透射率；
k 為摩爾吸收系數(shù)；
L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長；
c 為物質(zhì)的濃度；
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應(yīng)用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
測試只在可見光區(qū)有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。山東超微量分光光度計
MicroDrop可連接電腦/平板電腦，實現(xiàn)本地一指控制;WiFi無線連接功能，節(jié)省時間和空間。河北超微量超微量分光光度計菌液檢測
使用Micro Drop可以方便地使用微量樣品進行紫外－可見分光檢測：
1. 不用稀釋就可以檢測濃度小于15000ng/μl（dsDNA）的核酸濃度；
2. 普通的紫外－可見分光光度檢測；
3. 純蛋白濃度檢測（A280）；
4. 微陣列和Protein & Labels應(yīng)用中的熒光染料基團檢測；
5. BCA蛋白定量分析；
6. Bradford蛋白定量分析；
7. Lowry法蛋白定量分析；
8. Pierce 660nm蛋白定量分析；
9. 微生物細胞培養(yǎng)檢測。
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