超微量分光光度計在核酸定量和分析中的應用:
分光光度測定法是一項定量和分析生物成分的成熟技術。其中,核酸是生物實驗室**常檢測的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對許多下游實驗至關重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應用朗伯比爾定律通過它們的相關消光系數和樣品光程計算出來。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過樣品,而另一邊的光電檢測器則測定有多少光被吸收。通過對照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
Micro Drop微陣列檢測功能可以篩選有效的熒光標記雜交探針用于芯片試驗。江蘇全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應為基礎,并有所改進。蛋白質與Cu2+反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質的蛋白不適合此種方法。
重慶雙檢測模式超微量分光光度計核酸檢測熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。
Micro Drop蛋白質檢測功能:
Protein & Labels檢測類型:
Protein & Labels可以用來檢測蛋白的濃度(A280nm)和熒光染料的濃度(蛋白芯片標記物)。它還可通過吸光值的比值來檢測金屬蛋白(如血色素)的純度。
Micro Drop能夠準確檢測100pmol/μl的熒光染料和20mg/ml的蛋白(BSA)而不用稀釋。
1. 在功能鍵中選擇蛋白質,在檢測方式中選擇Protein & Labels。
2. 輸入樣品編號。
3. 從樣品下拉框中選擇檢測樣品的類型,默認的設定為1 Abs=1mg/ml。
4. 選擇濃度單位,默認的單位是mg/ml。
5. 使用下拉菜單來選擇染料,默認的染料1為Cy3,染料2為Cy5。
6. 可以選擇基線校正,默認的校準波長為340nm,也可以重新輸入一個校準波長。
7. 選擇疊加顯示可以在采樣曲線框中顯示多個檢測樣品的實驗結果。
8. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,使用合適的液體建立空白對照,空白對照液體能夠溶解目標溶液。空白對照液體的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣。
在分光光度計中,將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長(λ)為橫坐標,吸收強度(A)為縱坐標,就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法,稱為分光光度法,也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質的方法,稱為紫外分光光度法;用可見光光源測定有色物質的方法,稱為可見光光度法。它們與比色法一樣,都以Lambert-Bee定律為基礎。上海寶予德科學儀器有限公司歡迎大家來電咨詢!MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自動調整。
A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內;如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準確,樣品內有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。
熒光分光光度計有兩個單色器,而一般紫外可見分光光度計只有一個單色器。北京超微量分光光度計探針檢測
每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應消光因子。江蘇全光譜波長超微量分光光度計探針檢測
超微量分光光度計新晉小生——寶予德MicroDrop簡介:
一機多用:既可使用超微量基座,也可使用常規比色皿,想怎么測就怎么測!
開機即用:交貨后即可使用 – 安裝時不需要進行任何調節。
上樣量少:上樣范圍0.5μl-2μl,節約珍貴的樣本。
無線連接:無需數據線連接電腦,從此告別雜亂的數據連接線,儀器可自發WiFi信號。
全光譜范圍:可檢測185-910nm波長下樣本的吸光值,檢測范圍廣,基座模式下因為縮短了光程,檢測濃度范圍非常廣闊,dsDNA:2-15000ng/ul,無需稀釋樣品,簡化實驗流程,減少實驗誤差,能夠滿足極大部分用戶的需求。
檢測快速:全波長掃描時間只需5s,每個樣品所需要的時間不到5秒鐘,快速的檢測速度為大量的樣品檢測節省了寶貴時間。
美觀簡約:自重2.1kg,便于移動,占地面積小,節省實驗臺面空間。
數據存儲:可自定義選擇數據存儲,不僅能夠自動保存檢測原始數據,也可導出Excel數據表,方便計算后續實驗的加樣量。
江蘇全光譜波長超微量分光光度計探針檢測