A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關(guān),核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機(jī)溶劑污染,需要純化樣品。MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自動調(diào)整。福建操作簡便超微量分光光度計核酸檢測
傳統(tǒng)分光光度計:樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上;需使用比色皿,每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重;光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小;燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成,壽命短;需要預(yù)熱半個小時以上;顯示吸光度值,不顯示濃度值;儀器體積大,質(zhì)量重;超微量分光光度計;所需樣品體積小,*需1~2μL;不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上;具有多個光程(電機(jī)控制自動選擇光程),樣品無需稀釋,測量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計的50倍;氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩(wěn)定;不需要預(yù)熱,可隨時檢測;顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)。天津雙檢測模式超微量分光光度計價格優(yōu)惠每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)消光因子。
測試在紫外區(qū)有吸收的樣品時用石英比色皿,測試只在可見光區(qū)有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。石英比色皿在可見和紫外光區(qū)沒有吸收,而玻璃比色皿在紫外區(qū)有吸收,所以不能用于紫外光區(qū)。對于一般的非光學(xué)專業(yè)人員,用眼睛是不能分開的兩種比色皿的。但是兩者硬度差別很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)幾十倍,如果把兩個對磨,石英比色皿將很少被磨損,而玻璃比色皿磨損非常大。由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,***的譜段范圍內(nèi)沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有許多離子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿優(yōu)越的多,化驗數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確、更可靠。
寶予德MicroDrop超微量分光光度計既可使用超微量基座,也可使用常規(guī)比色皿檢測。青海高靈敏度超微量分光光度計核酸檢測
單光束分光光度計是由一束經(jīng)過單色器的光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進(jìn)行光強(qiáng)度測量。福建操作簡便超微量分光光度計核酸檢測