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福建操作簡便超微量分光光度計核酸檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-11-27

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個值跟儀器無關(guān),核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因為樣品中的雜質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會對光有一定吸收,其值<0.1);A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機(jī)溶劑污染,需要純化樣品。MicroDrop基座模式下光程1.0、0.2、0.1和0.05mm自動調(diào)整。福建操作簡便超微量分光光度計核酸檢測

傳統(tǒng)分光光度計:樣品體積要求大,絕大部分要50μL以上;需使用比色皿,每次換樣品時,比色杯需要清洗,工作繁重;光程一般為10mm,樣品需要稀釋,測量濃度范圍小;燈源一般由氘燈(紫外)和鎢燈(可見)組成,壽命短;需要預(yù)熱半個小時以上;顯示吸光度值,不顯示濃度值;儀器體積大,質(zhì)量重;超微量分光光度計;所需樣品體積小,*需1~2μL;不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測平臺上;具有多個光程(電機(jī)控制自動選擇光程),樣品無需稀釋,測量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計的50倍;氙氣閃光燈為燈源,壽命長,性能穩(wěn)定;不需要預(yù)熱,可隨時檢測;顯示吸光度值的同時,程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料)。天津雙檢測模式超微量分光光度計價格優(yōu)惠每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)消光因子。

光譜儀和分光光度計有什么區(qū)別?
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產(chǎn)生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強(qiáng)度來進(jìn)行定量分析的儀器叫做分光光度計。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因為中國上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計進(jìn)行了國產(chǎn)化,當(dāng)時的技術(shù)難點也就在分光技術(shù)上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計直接稱作分光光度計,所以分光光度計也特指紫外可見分光光度計。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實也是要有分光組件的,現(xiàn)在都是用光譜儀這個名詞來統(tǒng)稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計范圍要大一些,新一些。而分光光度計更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計因為它們在一般性的分析工作中也主要是用來定量的,這就造成了“分光光度計”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。

超微量分光光度計檢測蛋白A280:
蛋白和核酸不一樣,具有很強(qiáng)的多樣性。Protein A280功能應(yīng)用于檢測那些含有Trp、Tyr殘基或者含有Cys-Cys二硫鍵的純蛋白,這些蛋白在280nm吸光度明顯。Protein A280功能不需要構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線,而是檢測吸光度后,直接計算蛋白濃度。
Protein A280顯示紫外吸收光譜,檢測280nm處的吸光度后計算濃度(mg/ml)。和核酸檢測一樣,Protein A280記錄顯示的是10mm光程下的數(shù)據(jù)。
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核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率較高的功能。

測試在紫外區(qū)有吸收的樣品時用石英比色皿,測試只在可見光區(qū)有吸收的樣品時使用玻璃比色皿。石英比色皿在可見和紫外光區(qū)沒有吸收,而玻璃比色皿在紫外區(qū)有吸收,所以不能用于紫外光區(qū)。對于一般的非光學(xué)專業(yè)人員,用眼睛是不能分開的兩種比色皿的。但是兩者硬度差別很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)幾十倍,如果把兩個對磨,石英比色皿將很少被磨損,而玻璃比色皿磨損非常大。由于石英比色皿的透光范圍從0.12-4.5微米,***的譜段范圍內(nèi)沒有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有許多離子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿優(yōu)越的多,化驗數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確、更可靠。
寶予德MicroDrop超微量分光光度計既可使用超微量基座,也可使用常規(guī)比色皿檢測。青海高靈敏度超微量分光光度計核酸檢測

單光束分光光度計是由一束經(jīng)過單色器的光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進(jìn)行光強(qiáng)度測量。福建操作簡便超微量分光光度計核酸檢測

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器,因為應(yīng)用需求的不同,分光光度計有著不同的種類。分光光度計按照波長及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為:
(1)可見光分光光度計:用來測量待測物質(zhì)對可見光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。可在600nm測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
(2)紫外分光光度計:紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。
(3)紅外分光光度計:一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物**常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
(4)熒光分光光度計:熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xué)實驗等領(lǐng)域。
(5)原子吸收分光光度計:該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
現(xiàn)今生命科學(xué)領(lǐng)域比較流行的超微量分光光度計是屬于紫外分光光度計的一種。
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