超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:BCA法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應產生Cu+,后者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系極強,反應后形成的化合物非常穩定。相對于Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。Bradford法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其比較大的特點是,敏感度好,是Lowry和BCA兩種測試方法的2倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對于去污劑依然是敏感的。**主要的缺點是不同的標準品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。江西超微量分光光度計廠家直銷不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。
光譜儀和分光光度計有什么區別?使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強度來進行定量分析的儀器叫做分光光度計。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因為中國上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計進行了國產化,當時的技術難點也就在分光技術上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計直接稱作分光光度計,所以分光光度計也特指紫外可見分光光度計。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實也是要有分光組件的,現在都是用光譜儀這個名詞來統稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計范圍要大一些,新一些。而分光光度計更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計因為它們在一般性的分析工作中也主要是用來定量的,這就造成了“分光光度計”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc式中 :A 為吸光度;I0為入射的單色光強度;I 為透射的單色光強度;T 為物質的透射率;k 為摩爾吸收系數;L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;c 為物質的濃度;物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。Bradford法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應。
ε 摩爾吸光系數(Lmol-1cm-1),它與吸收物質的性質及入射光的波長λ有關。雙檢測模式超微量分光光度計試用
在生物醫學領域,超微量分光光度計常被用于研究生物大分子的結構和功能。例如,通過測量核酸的吸光度,可以推斷出其含量和純度。同樣,通過測量蛋白質的吸光度,可以了解蛋白質的結構和折疊情況。此外,超微量分光光度計還可用于監測細菌生長過程中的生理變化,為藥物的開發提供了有力的幫助。在化學領域,超微量分光光度計也被廣泛應用于樣品的定量和定性分析。其高靈敏度和寬廣的動態范圍使得即使是對痕量元素的分析也成為可能。此外,超微量分光光度計還可以通過光譜對比的方法,對不同樣品進行鑒別和分類,這對于地質學、材料科學等領域具有重要意義。雙檢測模式超微量分光光度計試用