OD值由下述公式計算:c為檢測物的濃度 b為檢測物的厚度 a為摩爾因子在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進行檢測,稱為測量波長。但是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。酶標儀可用于單克隆抗體篩分、凝血分靈敏度檢驗,以及其它需要進行比色的分析工作中。山東全自動酶標儀樣品檢測
如何測定的吸光度范圍?通常,酶標儀的吸光度測定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間,但現在基本上都做了拓寬,可達到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內的線性和精密度如何。酶標儀的光學系統采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現出來。光學系統好的話,則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。江蘇雙檢測模式酶標儀智能化酶標儀可以分為光吸收酶標儀,熒光酶標儀,化學發光酶標儀和多功能的酶標儀。
多功能酶標儀又稱為多功能微孔板檢測儀(機)或多功能微孔板檢測平臺,可一對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常,多功能酶標儀是指具有兩種及以更多檢測功能的儀器,通常的情況下至少可提供“吸收光”、“熒光”這兩種常見的檢測功能。而一些中端至多功能酶標儀還可支持“化學發光” 、“生物發光共振能量轉移” 、“時間分辨熒光”、“熒光偏振” 、甚至還可以支持“Western Blot”和“上轉換發光”等的高級檢測實驗。
血站實驗室為篩檢獻血員血進行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA測定時,常會遇到測定吸光度處于cut-off附近但又低于cut—off的血,按照試劑盒的標準,可判為陰性,血為合格血,可用于患者輸血,但直覺告訴我們,這樣的血如輸給患者,導致輸血后相應疾病發生的可能性較大,這是由ELISA現有的測定技術的不確定性所造成的,也就是ELISA測定的“灰區”的存在使得ELISA測定試劑盒cut-off的設定只是相對的準確,此時的假陽性和假陰性出現的可能性較低。因此,在血站篩檢獻血員血時,如以測定“灰區”的下限作為判斷獻血員血篩檢不合格標準,就可以避免因“灰區”所致結果判斷錯誤而引起輸血后疾病發生的可能性。K3 Plus酶標儀的通用內置軟件允許采用終點法及動力學讀取模式。
在用酶聯免疫法測定抗原或抗體時,不論是定量試驗還是定性試驗都要求使用酶標儀進行測定。一般的酶標儀在測定中均有單波長和雙波長的模式,并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有時會不太重視單波長和雙波長的選擇,對使用單、雙波長給測定結果帶來的較大差異也不很了解,***咱們就來了解一下這兩個測量方法。酶標儀與分光光度計、自動生化分析儀等的吸光度測定有所不同,一般分光光度計是水平光路,而酶標儀則是垂直光路,但測定原理相同,都是使用朗伯-比耳定律,測定的都是樣本的吸光度。垂直光的特點是標本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小,不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標板透光性、孔底是否平整等的影響較大。K3 Plus酶標儀適用于測量通過微孔板的吸光度值。遼寧操作簡便酶標儀酶聯免疫
波長100-400nm稱為紫外光,400-780nm之間的光稱為可見光,大于780nm稱為紅外光。山東全自動酶標儀樣品檢測
合適的軟件功能對于ELISA定量測定同樣很重要。有研究表明,四參數方程能較好地反映免疫測定的劑量反應曲線,*為適合于定量酶免疫測定的曲線擬合。因此,如目的是定量測定,則在酶標儀的軟件功能中,要有這種曲線回歸方程計算分析功能。其他諸如連點、直線等回歸計算,則可根據酶標儀的應用目的而定,如兼用于微量生化測定,則此類回歸計算就很有必要。此外,酶標儀兼做酶標動力學、凝集反應測定所需的軟件是否應具備,當然也應根據使用目的而定。由于此類軟件一般都較為昂貴,酶標儀常另外單獨按需配備,如果不是實驗室特殊需要,就不必強求這種軟件功能。山東全自動酶標儀樣品檢測