RNA提取中常見的問題：OD260/OD280比值偏低：蛋白質污染：確保不要吸入中間層及有機相。減少起始樣品量，確保裂解完全、徹底。加入氯仿后首先要充分混勻，并且離心分層的離心力和時間要足夠。如果所得RNA的OD260/OD280比值偏低，則用氯仿重新抽提一次，再沉淀，溶解。苯酚殘留：確保不要吸入中間層及有機相。加入氯仿后首先要充分混勻，并且離心分層的離心力和時間要足夠。多糖或多酚的殘留：一些特殊的組織和植物中，多糖、多酚含量較多，這些殘留也會導致OD260/OD280比值偏低。因此，從這類材料中提取RNA時，需要注意多糖、多酚雜質的去除。設備限制：測定OD260及OD280數值時，要使OD260讀數在0.1-0.5之間。此范圍線性較好。用水稀釋樣品：測OD值時，對照及樣品稀釋液請使用10mMTris，pH7.5。用水作為稀釋液將導致比值偏低。DNA提取的方法有很多種，包括CTAB法、鹽法、酚-氯仿法等。重慶血液RNA提取生產商

DNA提取的一些問題，為什么用酚與氯仿抽提DNA時，還要加少量的異戊醇？在抽提DNA時，為了混合均勻，必須劇烈振蕩容器數次，這時在混合液內易產生氣泡，氣泡會阻止相互間的充分作用。加入異戊醇能降低分子表面張力，所以能減少抽提過程中的泡沫產生。一般采用氯仿與異戊醇為24：1之比。也可采用酚、氯仿與異戊醇之比為25：24：1（不必先配制，可在臨用前把一份酚加一份24：1的氯仿與異戊醇即成），同時異戊醇有助于分相，使離心后的上層水相，中層變性蛋白相以及下層有機溶劑相維持穩定。重慶血液RNA提取生產商DNA提取需要用冰冷的乙醇或異丙醇乙醇沉淀DNA。

骨組織RNA提取之其它骨組織破碎方法：a.取100mg骨組織加入1ml預熱的裂解液CLB（已加有P的LANTaid）高速均質儀粉碎勻漿。或者取100mg液氮冷凍包埋切片粉碎的骨頭加入裂解液CLB（已加有P的LANTaid）粉碎勻漿。b.立刻接操作步驟的步驟。c.短時放回65°C水浴中（10min），中間偶爾顛倒1-2次幫助裂解。將裂解物4°C13,000rpm離心10分鐘，沉淀不能裂解的碎片。取裂解物上清（在不超過基因組DNA清理柱能力的情況下可以取更多的上清，這樣可以提高產量）轉到一個新離心管。加入上清體積一半的無水乙醇(0.5體積)，此時可能出現沉淀，但是不影響提取過程，立即吹打混勻，不要離心。若上清表面有漂浮物，用吸頭挑開吸取下面液體即可。將混合物(每次小于720μl，多可以分兩次加入)加入一個基因組清理柱中，（清理柱放入收集管中）13,000rpm離心2分鐘，棄掉廢液。

DNA提取鑒定方法：分光光度法：在260nm和280nm處測定DNA溶液的光吸收，A260與A280之比應在1.75-1.80之間。低于此值表明制備物中殘留蛋白質成分較高或含有酚，高于此值表明有RNA的殘留。凝膠電泳分析：影響瓊脂糖凝膠電泳DNA遷移率的因素：①DNA分子大小，DNA分子越大遷移速度越慢。②遷移率與瓊脂糖濃度成反比。③DNA構象：a.相同分子量的超螺旋環狀（Ⅰ型），切口環狀（Ⅱ型），線狀（Ⅲ型）DNA，以不同速率通過凝膠。b.一般情況下，遷移率Ⅰ型>Ⅲ型>Ⅱ型。④電壓：遷移率與所加電壓成正比，但是電壓過大有效分離范圍減小。⑤電場方向：單一方向速率均等，改變方向，極大分子DNA遷移更慢。通過脈沖電場凝膠電泳分離極大DNA。RNA提取需要使用酶或化學試劑來裂解細胞膜和核膜。

RNA提取和DNA提取實驗中常見問題及過程中的注意事項：RNA提取和DNA提取實驗在分子生物學中比較常用，但有時會出現產量低、純度低、易降解等情況，RNA提取和DNA提取實驗中常見問題：產量低：如果您遇到的DNA/RNA產量低于您對樣品的預期，則需要考慮許多因素。通常，這是一個裂解問題。不完全裂解是產量低的主要原因。它也可能是由不正確的綁定條件引起的。確保使用新鮮的好的乙醇（100%200標準）稀釋緩沖液或添加到結合的步驟。劣質乙醇或舊庫存可能已經吸收了水分，并且濃度不正確。如果洗滌緩沖液制備不正確，您可能正在洗掉提取的DNA或RNA。DNA提取需要脂質被洗滌劑和表面活性劑分解。重慶血液RNA提取生產商

RNA提取通常用于研究基因表達或RNA的功能。重慶血液RNA提取生產商

DNA提取檢測：溴乙錠染色：在254nm紫外光下檢測，如需回收較好在300nm紫外光下割膠。銀染法：Ag+與DNA形成復合物，在甲醛還原下可染成黑褐色，靈敏度高200倍，但不能回收。DNA提取回收：電泳到DEAE－纖維素膜：在所需條帶前插入DEAE－纖維素膜，繼續電泳至條帶DNA都到膜上，取出洗下。透析袋電洗脫：切下條帶的瓊脂糖放透析袋內，加緩沖液后繼續電泳，DNA出膠后回收。低熔點瓊脂糖凝膠：切下膠，加熱熔化膠，然后用酚抽提回收DNA。重慶血液RNA提取生產商

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