人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而打開細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。外泌體在疙瘩微環境中的參與，反映了其具有的高度的異質性和復雜性。血漿外泌體蛋白質提取

外泌體的表征分析：動態光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析儀測定外泌體制劑中的粒度分布。動態光散射測量由于溶液中粒子的布朗運動引起的散射光強度的動態波動，（685nm的激光，檢測角度為15、90、175度）；較小的粒子比較大的粒子移動得更快。確定顆粒大小時，通常使用三種分布類型：(1)數量分布，報告不同大小“箱”中的顆粒數量；(2)體積分布報告不同尺寸類別的顆粒總體積；(3)強度分布，報告不同大小顆粒散射的光。也可以使用高分辨率納米粒徑分析儀NanocoulterⅠ來分析樣品中每種大小的囊泡的實際數量、濃度及粒子動態、Zeta電位等。為了進行分析，將先前儲存在-20°C的75μl等分試樣的外泌體制劑用925μlPBS稀釋（得到1ml）并轉移到一次性比色皿中用于DLS測量。佛山細胞外泌體分離價格外泌體可以通過非典型途徑進行排毒，參與細胞解掉毒和化學治著的作用。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜，耗時，量少。

外泌體是直徑為30-150nm的小細胞外囊泡。在生理和病理條件下，幾乎所有類型的細胞都可以釋放外泌體，在細胞通訊和表觀遺傳調控中發揮重要作用。外泌體天然存在于體液中，包括血液，唾液，尿液和腦脊液等，內部含有其來源細胞的核酸，蛋白等物質，因此基于外泌體的疾病診斷和治著方法得到了深入的研究。但是如何拿到純凈的外泌體一直是外泌體研究所面臨的難題之一，因此研究人員也開發了許多外泌體分離的方法，來一起看一下吧。差速離心法：離心力從300×g到100,000×g的下進行多次循環離心，較后收集外泌體顆粒。密度梯度離心法：等密度梯度超速離心法是通過從下到上逐步降低密度分層。動區梯度超速離心法由兩個梯度介質部分組成，樣品根據密度/質量/大小被依次分離。外泌體來源于細胞內各種類型的囊泡，包括內質網、高爾基體和細胞膜等。

外泌體分離方法之超速離心法：超速離心基于顆粒的大小（重量）及其在離心力（100,000–110,000×g）下的離心沉降。至于去除的細胞碎片和不需要的顆?？梢酝ㄟ^稱為差速離心的幾步慢速離心來獲得。外泌體的純化可以采用蔗糖梯度密度離心純化法：即：在蔗糖梯度(1.13–1.19g/mL)或緩沖液中進行，以實現更高的富集、產量和純度增加。外泌體分離方法之微流控分離法：微流控分離法主要是在微芯片上進行的，這里我們需要提及的是，微流控分離法法可用于外泌體分離（免疫結合和磁結合、過濾），效率相對較高（約90%）。外泌體通過它們攜帶的間質基質組分，在宿主細胞中誘導上皮間質轉化等重要的生物學反應。佛山細胞外泌體分離價格

未來可開發更加高效和精確的外泌體分離和檢測技術。血漿外泌體蛋白質提取

分離外泌體的方法之密度梯度超速離心：有助于根據尺寸、結構和形態差異分離和分析納米級材料。DGUC“細化”分離的囊泡，并使用密度為1.07g/mL或更低的密度梯度培養基。水中碘沙醇、冰冷的PBS和蔗糖是用于外泌體分離的常見梯度培養基。有市售的碘沙醇密度梯度分餾膜，用于將外泌體與非囊泡成分分離。將生物懸浮液添加到梯度培養基中，并以完整的梯度分層組分。DGUC有助于分離具有相同梯度的樣品。凋亡小體、蛋白質聚集體和其他非外泌體微囊泡可能通過超速離心干擾較終分離的外泌體產物。DGUC有助于克服超速離心的局限性，并提供較純凈的外泌體。DGUC在精細化和高性能外泌體分離方法中的應用。簡而言之，在分離細胞碎片后，應用1×105g用60%碘沙醇離心3小時，然后用1×10離心5用40%碘沙醇g18小時有助于形成多達12個碘沙醇梯度級分和兩個外泌體級分。超速離心使用連續的密度梯度或逐步梯度來較小化這些顆粒材料對外泌體的干擾。血漿外泌體蛋白質提取

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