外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技術通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對分離的外泌體產生溫和影響而且可以產生中性的pH值。由此，出現了幾種常見的外泌體試劑盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速執行，無需額外設備，只需用高速離心機進行超速離心可以獲得高產量的外泌體。但是此方法的缺點是：非外泌體材料對外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個問題。此外，分離物中的聚合物可能會干擾下游分析。外泌體分離和分析的標準化和規范化將有助于外泌體研究領域的進一步發展。蘇州外泌體供貨商

差速離心法分離外泌體的實驗原理：與等密度和梯度離心相反，差速離心從離心管內顆粒的均勻初始分布開始。在開始一輪離心過程中，位于管底部附近的一部分目標小顆粒不可避免地與較大顆粒共同沉淀。這種共沉淀導致較小顆粒的產量降低。然而，選擇大顆粒，起初位于管半月板附近，在開始一輪離心過程中可能沒有足夠的時間到達管底，從而污染較后一個離心步驟產生的小顆粒顆粒。顯然，交叉污染的程度取決于不同粒子群的相對沉降速度和離心條件。在被分離的粒子的沉降速度之間存在顯著（數量級）差異的情況下，可以有效地優化差速離心協議以獲得目標粒子群的高產量和足夠純度。此外，當不同顆粒部分之間的沉降速率只存在微小差異時，優化過程不太成功。在這些情況下，取決于離心條件。無錫血漿外泌體分離公司外泌體通過調節免疫系統和疙瘩微環境，在疙瘩免疫治著中的作用日益受到關注。

為了正確使用外泌體作為DDS，我們必須考慮外泌體的成分和它們的形成途徑。然后，還應描述外泌體親和力和細胞攝取的特征。外泌體載體表現出不同的目的和功能，這要歸功于外泌體作為基本的轉運體本身就具有出色的特性。這可以用于細胞靶向，也可以作為藥物的額外增強。迄今為止，ExoCarta在外泌體中發現了大約10,000種蛋白質、3500種mRNA和超過1100種不同的脂質。對于系統審查，出現了許多很棒的數據庫，例如Vesiclepedia和ExoCarta，其中描述了外泌體分離程序和來源以及已識別的載體。

人體內多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內皮細胞、免疫細胞、血小板、平滑肌細胞等。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性。外泌體介導的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結合，進而靶細胞細胞內的信號通路。二是在細胞外基質中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合，從而打開細胞內的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。外泌體與細胞死亡形式相關，可以參與凋亡和壞死細胞的清理和處理過程。

分離外泌體的方法之超濾：它使用孔徑為50-450nm的膜過濾器從細胞碎片和較大的EV中分離外泌體。通過使用納米尺寸的濾膜，可以分離出目標尺寸的外泌體。超濾法通常用作超速離心的后續步驟，以及凝膠過濾和色譜的較后一步。超濾可以通過切向流過濾（TFF）或直流過濾（DFF）方法進行處理。DFF方法也稱為死端過濾，存在膜污染和顆粒分離受損的問題。此外，DFF只適用于小體積樣品，例如高達30mL的樣品。TFF也稱為錯流過濾是一種更快速、高效和方便的分離大規模外泌體體積的過程，TFF是樣品流體切向流過濾膜并避免形成濾餅或堵塞的過程。外泌體在疙瘩微環境中的參與，反映了其具有的高度的異質性和復雜性。無錫血漿外泌體分離公司

外泌體可以通過非典型途徑進行排毒，參與細胞解掉毒和化學治著的作用。蘇州外泌體供貨商

使用差速離心法分離外泌體主要需要注意的是轉子的選擇。“擺動桶”(SW)轉子和“定角”(FA)轉子，這些轉子的幾何形狀根本不同，因此沉降特性也不同。這些轉子之間的主要區別在于：FA轉子，與旋轉半徑相比，沉積顆粒的較大路徑長度通常較小，允許近似恒定遷移率并簡化描述。然而，第二個區別是圓形FA管的水平橫截面是橢圓形的，不同粒子的路徑長度根據軌跡與橢圓長軸的距離而不同。由于較短的路徑長度，外面顆粒可能沉降得更快，需要根據不同的實驗需要進行選擇。蘇州外泌體供貨商

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