磁珠法提取DNA提取方法：實驗步驟，磁珠法核酸提取一般可以分為四步：裂解——結合——洗滌——洗脫。裂解：核酸必須從細胞或其他生物物質中釋放出來，細胞裂解可通過機械作用、化學作用、酶作用等方法實現。其中，酶作用主要是通過加入溶菌酶或蛋白酶（蛋白酶K、植物蛋白酶或鏈霉蛋白酶）以使細胞破裂，核酸釋放。蛋白酶還能降解與核酸結合的蛋白質，促進核酸的分離。結合：磁珠表面帶負電荷，磁珠buffer是高鹽環境有帶正電荷的鹽離子，樣本被buffer影響，磷酸基團帶負電荷。DNA提取需要通過添加蛋白酶消化蛋白質。長春市microDNA提取

血清血漿MicroRNA提取：取出析出液和洗滌液，按以下操作：a)析出液：4.5mL加入25.5mL無水乙醇；9mL加入51mL無水乙醇。b)洗滌液：9mL加入21mL無水乙醇；18mL加入42mL無水乙醇。c)配制好的析出液及洗滌液如出現沉淀，可在37℃溶解，搖勻后使用。取2.0mL離心管1支，依次加入1mL血清/血漿樣本、100μL溶液E、700μL溶液Q，上下顛倒混勻，室溫/4℃靜置20分鐘。12,000rpm4℃離心5分鐘，棄上清，收集離心管內沉淀。向沉淀中依次加入200μL裂解液、4μLRNACarrier、及20μL消化液，漩渦震蕩至沉淀完全分散，56℃水浴10分鐘。加入500μL析出液，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響RNA的提取與后續實驗。將吸附柱放入收集管內，將上述溶液轉入吸附柱內，靜置2min，12,000rpm4℃離心1min，棄收集管內廢液。長春市microDNA提取DNA提取的過程中需要注意消毒和安全措施，以避免污染和傷害。

磁珠法提取DNA提取的優勢，磁珠法是納米科技與生物技術的完美結合，具有其他DNA提取方法無法比擬的優勢，主要體現在：1、能夠實現自動化、高通量操作，配合96孔的核酸自動提取儀，在以往做一個樣品的提取時間內可同時實現對96個樣品的處理，效率直接提高96倍，滿足了當前生物學高通量操作的要求，使得在大規模戴口罩爆發時能夠進行快速篩查原因，這個優點是其他方法難以趕超的。2、操作簡單、用時短，整個提取流程只有裂解、結合、洗滌、洗脫四步短時間內即可完成。3、安全無毒，不使用傳統方法中的苯、氯仿等有毒試劑，對實驗操作人員的傷害少，保護了實驗人員的身體健康。4、磁珠與核酸的特異性結合使得提取的核酸純度高、濃度大。5、靈敏度高，適合法醫樣本等痕量DNA提取。

DNA提取的原則：1.保證核酸一級結構的完整性；2.核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；3.其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到較低程度；4.其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。DNA提取的樣品準備：生物組織：一.較好新鮮組織，若不能馬上提取，應貯存-70℃或液氮。二.液氮冷凍敲碎研磨。三.組織勻漿法。四.液氮勻漿法。培養細胞：懸浮生長細胞：1500g離心，4℃10分種收集細胞。單層培養細胞：可用刮棒或胰酶消化后離心收集。血液樣品：血液樣品一.血液抗凝易用檸檬酸抗凝液（ACD）：檸檬酸0.48g；檸檬酸鈉1.32g；右旋葡萄糖1.47g加H2O至100ml，每6ml新鮮血液加1mlACD液零度保存數天，-70度長期貯存。RNA提取是從細胞或組織中分離RNA的過程。

DNA提取濃縮：一.固體聚乙二醇（PEG）濃縮：用透析袋外敷PEG至合適量。二.丁醇抽提濃縮：DNA溶液中水可分配到正丁醇或仲丁醇，但DNA不會。因此重復幾次可明顯減少DNA體積。三.乙醇或異丙醇沉淀：（1）需要陽離子鹽的存在，NaAc較常用,NaCl對含SDS樣品好，NH4Ac去除dNTP好。PiCl沉淀RNA好，但不能用于反轉錄前。（2）沉淀溫度與時間；0℃一4℃，12000g，10分鐘，小于100bpDNA需超速離心。四.精胺沉淀法：與DNA結合后使DNA結構凝縮沉淀，需在無鹽或低鹽溶液。DNA提取的主要分類：真核生物DNA、細菌DNA、質粒DNA、細胞懸液DNA、組織DNA。長春市microDNA提取

DNA提取需要使用化學試劑和設備，如離心機、研缽、酶等。長春市microDNA提取

血清血漿MicroRNA提取：將吸附柱放回收集管內，加500μL洗滌液至吸附柱內，12,000rpm4℃離心1min，棄收集管內廢液。將吸附柱放回收集管內，12,000rpm4℃離心2min，離去殘留的洗滌液。取出吸附柱，放入新的1.5mL離心管內，加入30-50μL洗脫液，靜置3min，12,000rpm4℃離心2min，收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步實驗或-20℃保存。血清血漿MicroRNA提取的注意事項：裂解液、洗滌液含有刺激性化學物質，操作過程請做好防護措施，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛，請立即用清水或生理鹽水沖洗，必要時請就醫。消化液、RNACarrier請于-20℃存放，避免反復凍融。長春市microDNA提取

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