外泌體（細胞外囊泡）目前被認為是通過生物活性脂質、蛋白質以及RNA來進行細胞之間的通訊，同樣外泌體也是目前研究較深入的細胞外囊泡，外泌體的直徑只有我們頭發直徑的百萬分之一（30~150nm），當多泡體與細胞膜融合時釋放到細胞外的時候，富含許多生物活性分子，如脂質、蛋白質、轉移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細胞外，這樣一來就可以被微環境中的靶細胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠處。而外泌體與“目標”進行交流方式主要有兩種途徑，一是通過胞吞作用被攝入到細胞內；二是通過膜融合的方式來與靶細胞膜進行融合，接著就會直接釋放其中含有的物質以及信息至靶標細胞，其實外泌體的作用形式是相互的靶細胞分泌含有細胞特異性RNA的外泌體作用于周圍細胞后可誘導其表型重組而獲得組織特異性的表型，而周圍細胞分泌的外泌體則可以通過調控蛋白表達來調控細胞的生理過程。外泌體與肺的關系密切，通過氣道和肺泡微環境的打開和修飾，參與肺疾病如肺結核、肺病等的發生和發展。廣州腦脊液外泌體哪家好

外泌體的表征方法之非光學方法：非光學方法主要包括掃描電子顯微鏡（SEM）、透射電子顯微鏡（TEM）、冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）、原子力顯微鏡（AFM）、免疫檢測方法（ELISA）、傅立葉變換紅外光譜（FTIR）、可調諧電阻脈沖傳感(TRPS)和單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)。SEM、TEM和AFM方法通常用于直接膜結構和形態測定，而ELISA檢測提供各種結構顆粒（主要是蛋白質和受體）的檢測和量化，例如，用于外泌體形態的確認。單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)也用于外泌體定量，但也可用于檢測特定標記物和確定外泌體亞群。青島肺泡外泌體穩定性好外泌體分離和分析的標準化和規范化將有助于外泌體研究領域的進一步發展。

外泌體衍生物miRNA的重要應用：miRNA是一類主要的小分子、單鏈、非編碼RNA分子，其成熟形式的長度在20到22個核苷酸(NT)之間，在幾乎所有生物途徑中發揮重要作用，包括細胞生長、增殖、分化、免疫反應，細胞凋亡，代謝和疙瘩發生。外泌體在體液中的主要作用是可以保護miRNA，防止其生物分子在非生理條件下（多次凍融循環、長期儲存和極端pH）降解。據報道，外泌體來源的miRNA在-20°C下可保持穩定長達5年，并且對凍融循環具有抵抗力.這也使外泌體成為病癥和其他疾病的潛在生物標志物。miRNA與包括病癥在內的許多疾病的發病機制有關，并且還被證明被遠端或附近的受體細胞吸收作為外泌體中的貨物，作為細胞間通訊的一種方法，可能會影響發病機制。所以，外泌體可以被看作是miRNA轉移至目標受體細胞的載體。

外泌體衍生物miRNA的重要應用：miRNA的靈敏生物標志物測定法主要用于檢測早期階段(0-1)疙瘩的存在。除了基于組織活檢的當前研究外，循環miRNA的研究是生物標志物研究中一個新的擴展領域，因為它們具有所有特征（miRNA分析、診斷、預后、治著反應和預測性生物標志物），可在液體活檢（生物體液）中檢測到,并且不需要對病人進行健康和疙瘩活檢。血液樣本等體液分析檢測使醫生和研究人員能夠及早了解病癥的發展狀況。miRNA被稱為基因表達的基本調節因子，尤其是在病癥中，并且在疙瘩發生、轉移和對各種療法的耐藥性中發揮重要作用。據報道，哺乳動物細胞每個細胞含有大約100,000個內源性miRNA分子。據估計，單個外泌體較多可攜帶約500個miRNA拷貝。正常人血液中的外泌體量在病癥患者中約為109個外泌體/ml。外泌體的定量檢測和分析可作為疾病診斷和治著中的新型指標。

分離外泌體的方法之降水：它是一種基于生物體液中外泌體的電荷沉淀的方法。帶負電荷的外泌體可以與PEG35,000Da基質中帶正電荷的魚精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌體的回收和重懸比基于超速離心的分離更有效。聚合物沉淀法以更少的勞動力和昂貴的設備分離尿外泌體的潛在益處。該方法首先利用DL-二硫蘇糖醇溶液還原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合網絡，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可實現外泌體的沉淀。還有利用聚合物沉淀方法并消除超速離心的商業試劑盒。ExoQuick?、Exo-spin?是來自Invitrogen?和miRCURY?的市售總外泌體分離試劑。外泌體在心血管系統中扮演著重要的調節作用，與各種疾病如心肌梗死、心衰等相關聯。廣州腦脊液外泌體哪家好

不同來源的外泌體可能需要采用不同的離心參數和分離方法。廣州腦脊液外泌體哪家好

外泌體分離方法之密度梯度離心法：這種方法將超速離心機的超速離心與蔗糖密度梯度相結合。具體地說，密度梯度離心用于將外泌體與非囊泡顆粒（例如蛋白質和蛋白質/RNA聚集體）分離。因此，該方法將囊泡與不同密度的顆粒分離。足夠的離心時間比較重要，否則如果外泌體部分具有相似的密度，則仍可能在外泌體部分中發現污染顆粒。該結構不會讓大于1μm的細胞和其他顆粒進入布線區域。一些較小的顆粒和細胞碎片可以進入微柱區域，但被納米纖毛排除，形成直徑為30-200nm的孔。纖毛結構選擇性地捕獲外泌體和小細胞外囊泡。廣州腦脊液外泌體哪家好