外泌體分離方法之免疫學分離方法：免疫學分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質標記物影響的抗體對外泌體進行標記。這些標記的外泌體可以進一步輕松處理和純化，例如，使用微芯片或磁珠。磁分離后，外泌體被純化，磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法，就可以獲得較高純度提取物，但不會分離出缺乏磁性標記抗體識別的表面標記的外泌體，這可能導致外泌體池表現效果不佳。這種方法雖然既省時又直接，輸出純度較高，但也需要較為昂貴的試劑。外泌體可通過特定的組裝和功能修飾，提高其對宿主細胞的選擇性靶向性。杭州快速提取外泌體報價表

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。二是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養和體內注射。2016.9《ScientificReports》雜志發表了該方法較新數據，表明PS法可提取相當高純度的外泌體。東莞腦脊液外泌體生產商外泌體在人體的主要作用是充當局部和全身信號和調節系統。

外泌體衍生物miRNA的重要應用：外泌體保護miRNA免于降解，使它們比游離miRNA更穩定，并能被特定受體細胞有效整合。因此，在外泌體攜帶的貨物中，miRNA可以提供有關它們來源的細胞類型、靶標和細胞狀態的身份信息。越來越多的證據表明，疙瘩細胞來源的外泌體已成為通過傳遞病miRNA促進疙瘩細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉移和疙瘩微環境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性疙瘩的生長和轉移至關重要，因為新血管可以提供額外的氧氣和營養物質，還可以清理廢物。比如：病細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和疙瘩轉移。

外泌體的構成：外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年，Valadi等發現鼠的肥大細胞分泌的exosome可以被人的肥大細胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質，不只是mRNA，exosomes所轉移的microRNA同樣具有生物活性，在進入靶細胞后可以靶向調節細胞中mRNA的水平。這一發現使得研究人員對exosome的研究熱情激增，截止已經通過286項研究發現了41860種蛋白質、2838種microRNA、3408種mRNA。一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調節外泌體膜與受體細胞的融合，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現于早期以及回收的核內體中，RAB7和RAB9主要出現于晚期的核內體。現有大量的研究發現外泌體中含有40種RAB蛋白。外泌體可以作為一種新型的藥物輸送系統，利用其高度選擇性的靶向性，有效地提高藥物的生物利用度。

外泌體分離方法之超速離心法：超速離心基于顆粒的大小（重量）及其在離心力（100,000–110,000×g）下的離心沉降。至于去除的細胞碎片和不需要的顆粒可以通過稱為差速離心的幾步慢速離心來獲得。外泌體的純化可以采用蔗糖梯度密度離心純化法：即：在蔗糖梯度(1.13–1.19g/mL)或緩沖液中進行，以實現更高的富集、產量和純度增加。外泌體分離方法之微流控分離法：微流控分離法主要是在微芯片上進行的，這里我們需要提及的是，微流控分離法法可用于外泌體分離（免疫結合和磁結合、過濾），效率相對較高（約90%）。分離前的細胞培養和收集條件也能對外泌體分離結果產生重要影響。杭州快速提取外泌體報價表

外泌體來源于細胞內各種類型的囊泡，包括內質網、高爾基體和細胞膜等。杭州快速提取外泌體報價表

分離外泌體的方法之超濾：它使用孔徑為50-450nm的膜過濾器從細胞碎片和較大的EV中分離外泌體。通過使用納米尺寸的濾膜，可以分離出目標尺寸的外泌體。超濾法通常用作超速離心的后續步驟，以及凝膠過濾和色譜的較后一步。超濾可以通過切向流過濾（TFF）或直流過濾（DFF）方法進行處理。DFF方法也稱為死端過濾，存在膜污染和顆粒分離受損的問題。此外，DFF只適用于小體積樣品，例如高達30mL的樣品。TFF也稱為錯流過濾是一種更快速、高效和方便的分離大規模外泌體體積的過程，TFF是樣品流體切向流過濾膜并避免形成濾餅或堵塞的過程。杭州快速提取外泌體報價表