穩定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！PEI轉染試劑是一種穩定的具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子。臨床級PEI轉染試劑試用裝試用

1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優化。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！工業用途PEI轉染試劑試用裝有使用說明嗎有誰用過Polysciences的PEI轉染試劑？

抗體藥物研發客戶提供小眾創新產品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養基質，轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發從R&D到Clinicaltrial以及后期商業化的無縫轉化；以及提供藥物開發和探索的抗體文庫定制和商業授權靈活的CHO工程細胞株以支持抗體藥物的商業化生產，以此希望幫助國內科研工作者快速地接觸世界范圍內的技術，分享研發工具進步帶來的技術紅利，終為細胞、基因產業以及再生醫學行業等乃至整個生命科學行業賦能！更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物。???如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?

Polysciences 轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(proton sponge)。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明，分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966（PEI 25K）轉染效率表現優良。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！PEI轉染試劑對復合物孵化的時間是有要求的，一般建議5~20分鐘之間.

準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養基稀釋適量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?PEI轉染試劑的殘留檢測方法怎么開發呢?臨床級PEI轉染試劑試用裝試用

有哪些不錯的PEI轉染試劑品牌？臨床級PEI轉染試劑試用裝試用

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養細胞。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?臨床級PEI轉染試劑試用裝試用