l型棒10的第二端12露在椎間孔外,有利于調整插入位置。***端11的長度大于等于第二端12的長度。在本實施例中l型棒的材料選擇的是h62黃銅。在另外的實施例中其材料可以是聚乳酸等其他材料,甚至可以用1個u型棒來代替2根l型棒插入腰4椎間孔和腰5椎間孔。u型棒的兩臂均為4mm長。手術成功標志為:當l型棒或u型棒正確插入,壓迫到背根神經節時,手術側的后肢肌肉呈現輕微的暫時性抽搐,且不引起鼠尾擺動。需要根據大鼠體重選擇l型棒或u型棒的直徑大小:當大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。實施例2、模型的效果檢測本發明已通過實驗驗證了該模型的效果。通過28天的觀察,確定了實施例1獲得的模型穩定且準確的模擬了腰椎間盤突出壓迫神經根后的跛行以及疼痛癥狀。圖3顯示了術后大鼠出現手術側(左側)后爪(見a部所示)沒有同其他三只爪一起抓握網架,而是蜷縮著,呈現不敢承重的表現。表1大鼠術后不同天數縮足閾值(單位:g)表1顯示了術后28天內11只大鼠雙下肢縮足閾值的具體的均值和標準誤。確定研究疾病目的了解影響疾病發生的內在與外在因素。江蘇口碑好的疾病動物模型建模
1、動物模型名稱:FSH聯合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:3~4周齡5、實驗動物體重:16~18g6、實驗動物環境:SPF級 1、實驗方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯合注射絨促性素(HCG)誘導。對雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測標準:合籠后次日雌鼠檢查出現陰栓,表明成功構建了超排懷孕小鼠模型。Balbc裸鼠疾病動物模型建模查閱已有的相關小鼠模型綜述文獻。
本能發明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關的***和/或檢測方面的研究,比如經顱磁刺激和核磁共振。本發明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經根的持續慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應用機械壓迫神經根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因學與臨床情況接近;2.相關的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩定性好,成功率高;4.造模關鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續對動物進行磁療,經顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測,為臨床研究提供理論依據。以下將結合附圖對本發明作進一步說明,以充分說明本發明的目的、技術特征和技術效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。
1、動物模型名稱:環磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級,1、實驗方法:環磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環磷酰胺,連續注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數較正常對照組小鼠明顯降低。上海東寰為您提供完善的裸鼠動物疾病模型。
設計了一套能夠特異性標記“穆勒膠質細胞”的系統,再將能誘導神經細胞形成的基因編輯系統,包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網膜。約1個月后,研究人員在小鼠的視網膜視神經節細胞層,發現了由穆勒膠質細胞轉分化而來的視神經節細胞。這些誘導而來的視神經節細胞,不僅可以對光刺激產生相應的電信號,還可以和大腦中正確的腦區建立功能性聯系,將視覺信號傳輸到大腦,成功恢復視覺功能。進一步的研究還表明,通過這一基因編輯技術,還能將小鼠模型中特定區域的“星形膠質細胞”非常高效地轉分化為多巴胺神經元。轉分化而來的多巴胺神經元,能將帕金森模型小鼠的運動障礙,逆轉到接近正常小鼠的水平。這項研究的負責人楊輝指出,盡管將膠質細胞轉分化為神經元的基因編輯技術在實驗室里取得重要進展,但要將研究成果真正應用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經節細胞能否再生?帕金森患者是否能通過該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉到靈長類模型,進一步深入研究。可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發病率低的缺點。嘉定區泌尿疾病動物模型建模
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即為本發明構建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發明所采用第二種技術方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構。步驟3中grna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發明的有益效果是:本發明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法,本發明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發揮調節作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調節作用。附圖說明圖1為本發明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質粒載體的構建圖;圖2為本發明pirb基因敲入的小鼠模型的構建方法的流程圖;圖3為本發明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結果鑒定電泳圖;圖4為本發明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結果圖。江蘇口碑好的疾病動物模型建模
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