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鎮江小鼠疾病動物模型建模

來源: 發布時間:2021-10-18

    引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰。技術實現要素:針對上述現有技術,本發明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發明根據“順鉑可誘導卵巢細胞凋亡,引起組織壞死,從而導致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結果可靠的實驗方法。本發明是通過以下技術方案實現的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:將劑量為按體重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規購買得到,比如齊魯制藥公司生產的順鉑。進一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。能夠準確模擬人相關特定功能與疾病特征。鎮江小鼠疾病動物模型建模

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腰椎間盤突出是造成全球大部分地區工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經成為臨床脊柱外科的常見病和多發病,而且發病人群越來越呈現年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導致腰椎纖維環出現變形、破裂,纖維環、髓核及軟骨終板單獨或同時外突,從而壓迫到坐骨神經、神經根或馬尾神經,患者出現腰部疼痛,牽連股部,下肢足部放射性疼痛,引起神經功能、運動功能障礙,特定身體部位出現麻痹或癱瘓癥狀。良好的腰椎間盤突出動物模型的建立,可以生動直觀的幫助醫療工作者理解腰椎間盤突出壓迫神經后,神經的病理生理變化以及疾病的發***展規律,并可以通過成熟的動物模型,探索有效的***方法。近年來,隨著對腰椎間盤突出癥的認識研究的不斷深化,人們希望通過建立一種可靠、有效的腰椎間盤突出的動物模型,通過施加干預因素,更加準確地觀察模型體內產生的變化,探究人體內疾病發生機理,并將研究成果推廣到臨床,為***腰椎間盤突出癥提供合理、有效的防治手段。因此。淮安大鼠疾病動物模型建模確定研究疾病目的了解影響疾病發生的內在與外在因素。

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    圖2是從側面展示的壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。圖3是術后大鼠四肢表現情況。圖4是術后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復經顱磁刺激對大鼠背根神經壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發明的技術方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發明的進一步說明,而不是限制本發明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態)。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經根4和腰5神經根5的位置關系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。

    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉基因已經整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。構建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇?

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1、動物模型名稱:環磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環境:SPF級,1、實驗方法:環磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環磷酰胺,連續注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數較正常對照組小鼠明顯降低。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來。南京哪一家疾病動物模型建模

動物疾病模型的另一個富有成效的用途。鎮江小鼠疾病動物模型建模

人乳腺*裸鼠模型:1、實驗方法:**細胞移植法、**組織塊移植法。a.**細胞移植:**細胞在二氧化碳培養箱培養至足夠數量。取對數生長期的**細胞,用0.25%胰酶消化,用不完全培養液配成濃度不低于1×107個/mL的細胞懸液,于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細胞懸液,注意每次注射前需混勻細胞懸液。b.**組織塊移植:**接種于動物長至1cm時,取新鮮的**組織塊,在不完全培養液中漂洗,切取生長良好、魚肉裝的瘤組織,將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒,剪一小口,將小**塊經這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊,如切口較大需要縫合切口。鎮江小鼠疾病動物模型建模

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