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來源: 發布時間:2022-11-16

來源:ZSCI基礎研究中如果加入動物實驗部分則使得研究更加趨于完善,投稿時中稿率也相應會增加。但將動物實驗做好卻不是一件容易的事情。這篇文章主要講動物模型的構建技術,把骨科、糖尿病相關的動物模型構建做了一個***的技術匯總,建議先碼后讀,文章內容有部分做了簡化,想看詳細講解可以在文末獲取課件!一、骨科相關動物模型1.骨關節炎1)骨關節炎模型構建方法(誘發性)-關節腔內手術法、關節腔注射法。2)模型評分標準①SafraninO染色與OARSI評分(PMID:31046827、30942801)②HE染色與OARSI評分(PMID:30609097)③SafraninO染色與Mankin評分(PMID:30609097)2.骨質疏松癥1)骨關節炎模型構建方法去趨法模型PMID:31037128實驗動物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下進行雙側卵巢切除術以誘導骨質疏松癥,同時對照組小鼠*進行卵巢外置但未切除。2)模型檢測指標(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相關指標檢測3.類風濕性關節炎類風濕性關節炎(RA)是一種慢性自身免疫性疾病狀態,其特征是滑膜增生,軟骨退化和脊椎關節的骨侵蝕4.強直性脊柱炎1)強直性脊柱炎模型構建方法2)模型檢測指標。疾病動物模型建模廠家。江蘇哪家公司提供疾病動物模型建模

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得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據大鼠體重選擇l型棒的直徑大小:當大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。江蘇哪家公司提供疾病動物模型建模歡迎致電咨詢疾病動物模型建模。

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本能發明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關的***和/或檢測方面的研究,比如經顱磁刺激和核磁共振。本發明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經根的持續慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應用機械壓迫神經根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因學與臨床情況接近;2.相關的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩定性好,成功率高;4.造模關鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續對動物進行磁療,經顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測,為臨床研究提供理論依據。以下將結合附圖對本發明作進一步說明,以充分說明本發明的目的、技術特征和技術效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖

具體實施方式下面結合附圖和具體實施方式對發明作進一步闡述。本發明構建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內。具體來說,構建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進入rosa26基因的內含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內含子設計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數據庫基因,采用crispr脫靶效應軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構;步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序對打靶質粒載體進行驗證,圖1為構建好的pirb基因打靶載體的示意圖。查閱已有的相關小鼠模型綜述文獻。

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葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結腸炎小鼠模型:1、動物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結腸炎小鼠模型2、實驗動物種屬:BALB/c小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年鼠5、實驗動物體重:18g-22g6、實驗動物環境:SPF級1、實驗方法:實驗前小鼠禁食不禁水24h,24小時后提起鼠尾將其懸空,使掙扎以排出大腸遠端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)溶液,連續14天。進行疾病活動指數(DAI)的評估、取結腸進行組織病理學檢查。2、檢測標準:DAI評分明顯升高,與對照組比較具統計學意義。結腸病理鏡檢可見結腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變.收集研究疾病的生物學信息資料。靜安區疾病動物模型建模公司

人類疾病的動物模型是指各種醫學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現的動物。江蘇哪家公司提供疾病動物模型建模

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統和神經系統的功能以及下游的調節機制。本發明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構建方法。本發明所采用的第一種技術方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內含子1內,所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發明所采用的第二種技術方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法,將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。江蘇哪家公司提供疾病動物模型建模

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