pcrmix:反應條件:pcr擴增產物的電泳鑒定結果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產物沒有這兩個擴增產物。(c)短鏈pcr反應,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產物,而野生型沒有。pcr體系:反應條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。找疾病動物模型建模,就找上海東寰。連云港口碑好的疾病動物模型建模
配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實驗建立大鼠卵巢早衰模型1.實驗儀器及材料:如表1所示。表12.實驗方法:①動物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,體重180-220g。普通環境飼養,滅菌飼料飼養,自由飲水。②分組及給藥劑量:如表2所示。表2③給藥途徑及頻率:腹腔注射;2mg、3mg組連續注射7天;4mg、6mg組***天、第八天注射;對照組連續7天注射生理鹽水。④病理檢測:末次注射后15天,動物麻醉,采集血液,分離血清,elisa法測定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動物,取卵巢組織稱重,對大鼠的卵巢組織形態學進行觀察。注射期間每天稱重,給藥后每周稱重兩次,每天進行陰道涂片檢測動情周期。3.統計方法:采用graphpad進行統計分析。所有計量資料均采用均值±標準差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異,p<。4.試驗結果:(3mg組注射完成后*存活一只,不進行統計)如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示:①***水平:與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低,但是只有2mg組有明顯降低(p<),如圖1所示;與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖2所示;與空白組相比。浦東新區面癱疾病動物模型建模小鼠疾病模型研究也是人相關疾病藥物研發的起點。
1、動物模型名稱:酒精誘導的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-160g6、實驗動物環境:SPF級。1、實驗方法:用酒精誘導法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油=1:3,連續灌服60天。解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:肝組織可見肝硬化病理改變(S1級~S4級)。
誘發性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細胞遺傳特性異常而呈現出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學性、物理性及生物性致*物,而化學性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達一千余種,用于誘發實驗性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實驗工作中應根據需要選用適當致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或實驗條件。基本原理:利用外源性致*物引起細胞遺傳特性改變,從而出現異常生長和高增殖活性細胞形成**。外源性致*物主要有化學性、物理性(如放射性物質)及生物性(如誘發動物**的病毒),其中以化學性致*物**為常用如何定義好的小鼠疾病模型?
上海東寰生物科技有限公司模型特點:煙霧、空氣污染物或者有害氣體誘導模型使用的物質、暴露的劑量、頻次和時間不盡相同;脂多糖造模時間短,可用來模擬急性加重反應,但不能反應慢性病變的過程,使動物機體內存在致敏物,然后氣道局部激發(反復霧化或者滴鼻激發),誘導。模型特點:造模時的致敏激發的時間間隔、劑量和頻次不盡相同,通常通常需要和其他造模方法聯用。2.基因模型實驗動物:α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠獲得方式:直接購買模型特點:α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是經典的COPD轉基因模型,更準確地理解易感基因的致病機制。上海東寰告訴您如何選擇好的動物模型。無錫纖維化疾病動物模型建模
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機械通氣致肺損傷模型實驗動物:兔子、大鼠獲得方式:使用呼吸機,予以特定的通氣模式(例如:大鼠接受20mL/Kg的潮氣量、85次/min的呼吸頻率2h)模型特點:急性肺損傷病理特征之一的透明膜常出現于大型的實驗動物模型,而在大鼠或小鼠中很少出現,因此進行機械通氣致肺損傷造模動物的選擇需要謹慎。2.吸入性急性肺損傷模型實驗動物:小鼠、大鼠、兔子造模試劑:煙霧、空氣污染物及有害氣體、脂多糖、活菌獲得方式:通過吸入、氣管內滴入或靜脈滴注脂多糖、活菌、煙霧、有害化學試劑及氣體等導致肺連云港口碑好的疾病動物模型建模
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