本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組份,同時提供了藍色細胞核染料Hoechst33342,可以用來復染所有細胞核,也可用于細胞周期分析。使用本試劑盒所做結果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀或熒光酶標儀進行檢測,也可以用于高內涵篩選(High-Content Screening, HCS)。對6孔板培養的細胞(每孔500μl的Click反應液)、96孔板培養的細胞(每孔50μl的Click反應液)、每管細胞數量為10-100萬的流式細胞儀檢測(每管500μl的Click反應液)以及冰凍或石蠟切片的檢測(每個樣品100-200μl的Click反應液)EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。北京哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒
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普遍應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發現,EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創新方法。但是,現在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效,節約反應時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號,分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。EdU細胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。
EdU標記(a)將細胞完全培養基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養基;(b)提前將2xEdU標記培養基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養基孵育細胞2小時,棄培養基;注:1)培養時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態;2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留你知道EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點嗎?北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
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試劑盒以外自備試劑和儀器:●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標儀使用方法:使用注意事項:●接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉淀下來,導致每孔中的細胞數量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下。培養板周圍一圈孔培養基容易揮發,為了減少誤差,建議培養板的四邊每孔只加培養基,而不作為指標檢測孔。●培養時間根據細胞種類的不同和每孔內細胞數量的多少而異。●用水或乙酸洗細胞時充滿孔后保持一會倒掉即可,也可以用排或洗板機。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例:1.取出培養好待測的96孔板。2.在培養基表面小心加入50μl固定液(懸浮細胞加100μl固定液),靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細胞可棄培養基后加入用水3倍稀釋的固定液;懸浮細胞必須直接加入固定液,輕加在培養液面,靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時,可使懸浮細胞固定在培養孔底部)。 北京哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒