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海南培養基條件中鹽核酸酶70950-160

來源: 發布時間:2024-03-07

ArcticZymes產品廣泛應用于藥物生產、分子研究、體外診斷等領域。例如,在藥物生產領域,鹽活性核酸酶(SANs)系列產品用于細胞基因藥物及Vaccine的virus載體生產過程。在分子研究領域,蝦堿酶(SAP)、DNA酶(Dnase)、蛋白酶(AZ Proteinase)、連接酶(R2D Ligase)等用于頭部Life Science品牌的科研kit中。在體外診斷領域,等溫擴增酶、UNG酶、蛋白酶等產品應用于國際TOP診斷公司的生產流程中。此外,ArcticZymes專注于開發更好的解決方案,不斷超越合作伙伴的期待,從而與合作伙伴建立牢固可靠的關系。中鹽核酸酶能夠將單鏈及雙鏈的DNA及RNA,消化成5個堿基為主的寡核苷酸oligos。海南培養基條件中鹽核酸酶70950-160

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上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學院及生物醫藥產業界人士,于2018年1月共同創立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材,遵守相關法規要求,如cGMP規范、ISO13485質量管理體系認證等,致力于為診斷領域如分子診斷及病原微生物檢測研發等,藥物研發領域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規、高質量物料及專業服務,以期與客戶共同協作,加快研發及生產進度,為客戶提供更多價值。四川M-SAN中鹽核酸酶70950-202M-SAN HQ中鹽核酸酶在細胞培養條件或生理鹽濃度下具有較高活性。

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ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內切酶,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環狀)的DNA和RNA;都來自于深海microbes,通過Pichia pastoris發酵生產得到。這兩款酶的區別在于發揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM。

在不同的鹽濃度條件下,AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結合到HCD上,從而產生病毒顆粒團聚現象。隨著溶液鹽濃度上升,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,AAV病毒顆粒會逐漸解離。當鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),AAV病毒顆粒與HCD的結合更弱,AAV顆粒更穩定。因此,在高鹽濃度溶液中,AAV顆粒更加穩定,且有數據表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以,我們推薦提高AAV病毒生產中的鹽濃度。中鹽核酸酶適宜pH范圍廣(pH7.2-8.7),且在125–250mM鹽濃度內具有較高活性。

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宿主細胞DNA殘留的擔憂是基于致ai風險理論,特別是生產細胞系所包含的致ai序列,比如較常見腺病毒基因E1A和E1B(HEK293, PerC.6 和CAP 細胞系),人乳tou瘤病毒E6和E7基因(HeLa細胞系)等。當使用致ai細胞系生產AAV時,下游純化須盡可能減少殘留DNA。工業上一般使用核酸酶分解殘留DNA,普遍認為小于200 bp的DNA片段可有效降低致ai風險。宿主細胞蛋白殘留與免疫原性、炎癥或過敏性休克有關。盡管與非人類的生產原料相比(非人類細胞系如BHK21或昆蟲細胞,以及輔助病毒如HSV、腺病毒、桿狀病毒),人類細胞免疫原性比較弱。在已有工藝中,不需做任何調整,用中鹽核酸酶能夠完全替換全能核酸酶,且去除HCD效率更高;浙江生理鹽條件中鹽核酸酶70950

中鹽核酸酶更適合細胞培養體系,相比全能核酸酶,酶用量減少到1/3-1/2,HCD去除效率更高。海南培養基條件中鹽核酸酶70950-160

倫敦大學學院(UCL)的工藝開發團隊,在細胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)生產過程中,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時間、各階段LV的穩定性等方面的表現,發現在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時間更短,同時用納米顆粒分析(NTA)技術確認M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩定性更高。他們會繼續探究HCD是否影響LV的穩定性,及對LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究,我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產的關鍵機制。海南培養基條件中鹽核酸酶70950-160