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福建等滲條件中鹽核酸酶70950-160

來源: 發布時間:2024-04-16

ArcticZymes產品廣泛應用于藥物生產、分子研究、體外診斷等領域。例如,在藥物生產領域,鹽活性核酸酶(SANs)系列產品用于細胞基因藥物及Vaccine的virus載體生產過程。在分子研究領域,蝦堿酶(SAP)、DNA酶(Dnase)、蛋白酶(AZ Proteinase)、連接酶(R2D Ligase)等用于頭部Life Science品牌的科研kit中。在體外診斷領域,等溫擴增酶、UNG酶、蛋白酶等產品應用于國際TOP診斷公司的生產流程中。此外,ArcticZymes專注于開發更好的解決方案,不斷超越合作伙伴的期待,從而與合作伙伴建立牢固可靠的關系。US FDA指南要求:重組biologics終產品中,核酸雜質含量低于10ng/dose。福建等滲條件中鹽核酸酶70950-160

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上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學院及生物醫藥產業界人士,于2018年1月共同創立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材,遵守相關法規要求,如cGMP規范、ISO13485質量管理體系認證等,致力于為診斷領域如分子診斷及病原微生物檢測研發等,藥物研發領域如細胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細胞及外泌體研究等客戶提供合規、高質量物料及專業服務,以期與客戶共同協作,加快研發及生產進度,為客戶提供更多價值。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶70950-202生理鹽濃度下,M-SAN HQ中鹽核酸酶性能優于常用核酸酶。

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大多數研究級別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應用的,濃縮基本上是通過兩步離心法產生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化,然后溶解在配方緩沖液中。一種改進,特別是純度方面的改進,基于離心/色譜聯用的純化方法。例如,Kutner等評估了組合純化/濃縮方法。蔗糖緩沖的超速離心結合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率,而相反的組合則獲得了77.6%的收率。在兩種方法中,濃縮都超過了100倍,病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒)。

逆轉錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細胞基因組,并穩定持久地表達,已經在批準的CAR-T產品和許多臨床產品中得到應用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV,gamma逆轉錄病毒)作為基因轉移載體醫治兒童的X性染色體連鎖嚴重聯合免疫缺陷(SCID-X1)。目前上市的6個細胞藥物產品全部采用逆轉錄病毒(3個為gamma逆轉錄病毒載體,3個慢病毒載體)作為基因轉移載體。逆轉錄病毒載體目前常用的主要有兩個:gamma逆轉錄病毒載體(Retroviral vector,RV)和慢病毒載體(Lentivirus vector,LV)。兩種病毒均屬于逆轉錄病毒科,在自身攜帶的逆轉錄酶催化下將其正鏈RNA均逆轉錄為cDNA。病毒顆粒比較大,約為100nm(70-100nm,有的至200nm),外層為表面突起的脂蛋白套膜,套膜內為20面體的衣殼(capsid),核衣殼內由一螺旋結構的核酸。中鹽核酸酶的生產在符合ISO13485:2016體系基礎上,增加了cGMP相應要求。

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文章作者按照經典的慢病毒載體生產流程操作,在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣,分別檢測dsDNA濃度及功能性LV病毒滴度。經過分析發現,——去除主要發生在澄清環節,能去除dsDNA的80%-90%;2. M-SAN HQ中鹽核酸酶比Benzonase能更高效去除dsDNA,即M-SAN HQ組的TFF回流液中dsDNA殘留量是Benzonase組回流液的20%左右;3. LV病毒滴度在澄清環節損失30%-40%;4. M-SAN HQ組的TFF回流液中LV病毒滴度略高于Benzonase組的回流液數據。中鹽核酸酶更適合細胞培養體系,相比全能核酸酶,酶用量減少到1/3-1/2,HCD去除效率更高。青海M-SAN中鹽核酸酶70950-202

M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下具有更高活性,降解HCD效率更高,便于HCD的去除。福建等滲條件中鹽核酸酶70950-160

此外,文章作者對每個步驟的樣品進行納米顆粒分析(NTA),結果發現:澄清環節后,M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現比較明確的LV病毒顆粒峰;TFF處理后,回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳,表明病毒顆粒分散度更好、穩定性更高。回流液的NTA結果進一步表明,M-SAN HQ中鹽核酸酶處理組只有一個病毒顆粒峰,而Benzonase處理組的回流液中有三個峰。作者推測Benzonase處理組的病毒顆粒還有嚴重的病毒團聚現象,而呈現多峰現象。福建等滲條件中鹽核酸酶70950-160