與IdeS不同，為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物，用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白質消化該蛋白質，該蛋白由與瓊脂糖珠共價偶聯的GlySERIAS酶組成。通過將酶偶聯到樹脂上，可以增加酶與蛋白質的比率，從而可以進一步加速反應，以獲得更完整的連接子消化。此外，該酶不會存在于樣品制備中，可能會干擾樣品分析。為了進行比較，度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化過夜，或用GlySERIAS凍干1小時并在37°C下過夜消化。 為了降低樣品復雜性，使用內切糖苷酶GlycINATOR凍干去除Fc聚糖，并減少鏈間二硫鍵。通過反相LC-MS對樣品的分析表明，GlySERIAS Immobilized幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子，留下了接近均質的Fc/2產物，其中含有來自連接子的一個絲氨酸殘基。用 GlySERIAS 凍干 1 小時或過夜消化，兩者都會產生幾種 Fc 產物，并附著不同數量的絲氨酸和甘氨酸殘基。GLP-1肽在所有三個樣品中以兩種變體存在。使用GlySERIAS固定化消化的均質Fc/2能夠詳細研究特定于Fc區域的質量屬性。此外，在樣品中未觀察到干擾分析的酶峰。作為補充，Fc/2 產物在用 GlySERIAS 凍干消化后殘留部分連接子，有助于研究位于 GS 連接子的修飾。Genovis的FabDELLO作用于人 IgG1 鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基。江西GingisKHANIdeS蛋白酶

Genovis將固定化酶固定在磁珠上，用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產生均質的F（ab'）2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計，但在無法實現自動化的情況下，在振動臺上的表現同樣出色。酶切消解后，樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析，或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發和潛在生物制藥穩定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險，并提高通量。山西IdeS蛋白酶抗體酶切Genovis提供FabRICATOR （IdeS）驗證包。三種不同批次的凍干酶，用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。

其他基于 IgG 的生物制藥需要仔細表征和監測關鍵質量屬性，例如氧化、糖基化和其他翻譯后修飾。與抗體的克隆選擇、工藝開發和穩定性研究相關的大量樣品通常通過液相色譜質譜 （LC-MS） 進行分析。然而，在LC-MS之前進行足夠規模的樣品制備通常具有挑戰性。為了解決樣品制備的挑戰，Genovis將半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR（IdeS）固定在磁性瓊脂糖珠上，現在稱為FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上，可同時快速自動消化多種抗體，促進中級表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以較少的用戶交互減少實驗和操作時間，降低樣品處理錯誤的風險，同時提高通量。

蛋白酶用于生成肽，用于質譜分析蛋白質。這些應用包括蛋白質組學和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣品制備誘導的偽影，傳統的蛋白酶并不總是理想的，因此需要具有不同特異性的蛋白酶工具箱。Genovis的GingisREX 是一種精氨酸特異性蛋白酶，可將蛋白質 C 末端消化為精氨酸殘基。與胰蛋白酶肽相比，所得肽更長，并可能導致序列覆蓋率增加。質譜分析中蛋白酶的特異性對于獲得高質量的數據集和避免復雜的數據解釋至關重要。作為模型底物，使用胰島素氧化β鏈來比較 GingisREX 和 ArgC 的酶特異性。胰島素氧化β鏈含有一個精氨酸和一個賴氨酸殘基。在RP-HPLC和質譜法上分析GingisREX和ArgC的酶切肽。GingisREX在賴氨酸殘基上沒有酶活性或其他額外活性，即使在長時間孵育過夜后，酶與底物的比例也很高（1：5）。然而，ArgC在精氨酸殘基上顯示出主要活性，但在賴氨酸殘基上也可以看到酶消化。在酶與底物的比例為 1：20 和過夜孵育下，證明了 ArgC 的額外非特異性活性。在相同條件下，GingisREX未檢測到這種情況。數據證實了GingisREX精氨酸殘基的特異性活性，并顯示使用Arg-C在賴氨酸和其他殘基處的非特異性消化。Genovis的GingisKHAN 可以消化單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白。

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子，現在有了Genovis的一些新產品（IgA酶，IgM酶），其他的模式和分子形式（IdeS高通量的產品形式）來測定和監測許多不同的CQA，Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好，但如果分析團隊不能足夠快地處理它們，那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法，當然這些方法要快速，而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的，這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險，并提高通量。江西GingisKHANIdeS蛋白酶

在抗體藥及核酸藥領域，倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程，抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶。江西GingisKHANIdeS蛋白酶

大多數zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架，雙特異性和多特異性形式的開發正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性，例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化，這需要優化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性，它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1，并產生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性，通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現了完全消化，包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發中的用途。江西GingisKHANIdeS蛋白酶