與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來(lái)自多個(gè)不同物種和亞類(lèi)的IgG的鉸鏈區(qū)域消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產(chǎn)生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點(diǎn)是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結(jié)構(gòu)研究。對(duì)來(lái)自多個(gè)物種和亞類(lèi)的IgG有活性–上鉸鏈區(qū)域的消化物;快速-在一小時(shí)內(nèi)生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來(lái)源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達(dá)。FabULOUS的分子量為29kDa,該酶含有His標(biāo)簽。為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的、自動(dòng)化,高通量的替代方法。山東GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
蛋白酶用于生成肽,用于質(zhì)譜分析蛋白質(zhì)。這些應(yīng)用包括蛋白質(zhì)組學(xué)和生物制藥的深度表征。由于遺漏了切割和樣品制備誘導(dǎo)的偽影,傳統(tǒng)的蛋白酶并不總是理想的,因此需要具有不同特異性的蛋白酶工具箱。Genovis的GingisREX 是一種精氨酸特異性蛋白酶,可將蛋白質(zhì) C 末端消化為精氨酸殘基。與胰蛋白酶肽相比,所得肽更長(zhǎng),并可能導(dǎo)致序列覆蓋率增加。質(zhì)譜分析中蛋白酶的特異性對(duì)于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)集和避免復(fù)雜的數(shù)據(jù)解釋至關(guān)重要。作為模型底物,使用胰島素氧化β鏈來(lái)比較 GingisREX 和 ArgC 的酶特異性。胰島素氧化β鏈含有一個(gè)精氨酸和一個(gè)賴(lài)氨酸殘基。在RP-HPLC和質(zhì)譜法上分析GingisREX和ArgC的酶切肽。GingisREX在賴(lài)氨酸殘基上沒(méi)有酶活性或其他額外活性,即使在長(zhǎng)時(shí)間孵育過(guò)夜后,酶與底物的比例也很高(1:5)。然而,ArgC在精氨酸殘基上顯示出主要活性,但在賴(lài)氨酸殘基上也可以看到酶消化。在酶與底物的比例為 1:20 和過(guò)夜孵育下,證明了 ArgC 的額外非特異性活性。在相同條件下,GingisREX未檢測(cè)到這種情況。數(shù)據(jù)證實(shí)了GingisREX精氨酸殘基的特異性活性,并顯示使用Arg-C在賴(lài)氨酸和其他殘基處的非特異性消化。湖南FabRICATOR ZIdeS蛋白酶抗體酶切Genovis的FabDELLO可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人 IgG1,在兩小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。
作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,IgA在自身免疫性疾病、過(guò)敏反應(yīng)、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發(fā)揮作用。在天然條件和復(fù)雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫(yī)學(xué)和研究中具有重要價(jià)值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復(fù)雜性并簡(jiǎn)化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個(gè)顯著結(jié)構(gòu)差異是鉸鏈區(qū)域。與IgA2相比,IgA1具有更長(zhǎng)的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區(qū)域。IgASAPSub1的消化位點(diǎn)位于該擴(kuò)展區(qū)域,使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類(lèi)以三種等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和纈氨酸(V)之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區(qū)域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸(R)殘基取代,因此這兩種同種異體型的IgA2對(duì)消化具有抗性。
與IdeS不同,Genovis的IgASAP是IgA消化酶家族。IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,而IgASAPSub1+2特異性消化鉸鏈上方的IgA1和IgA2m1。兩種酶都產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAP酶能夠生成完整的單價(jià)Fab片段以及IgA的中級(jí)分析,從而促進(jìn)IgA的表征,例如,在疫苗、zhiliao和診斷的開(kāi)發(fā)過(guò)程中。獨(dú)特的酶促工具,可實(shí)現(xiàn)IgA的中級(jí)表征和質(zhì)量控制;生成均相的Fab和Fc片段,并保留免疫反應(yīng)性;高度特異性–人IgA鉸鏈上方的一個(gè)消化位點(diǎn)。可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人 IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。
經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中,細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級(jí)MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級(jí)膠原酶、AAV滴度檢測(cè)產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術(shù)、QED抗體對(duì)、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國(guó)BASF、德國(guó)Sartorius、德國(guó)Nordmark、瑞典Genovis、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物等。消化在1小時(shí)內(nèi)完成,且具有特異性。即使孵育時(shí)間延長(zhǎng),也沒(méi)有過(guò)度消化的風(fēng)險(xiǎn)。北京FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
QC方法需要執(zhí)行簡(jiǎn)單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析。山東GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)
不同于IdeS,Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人 IgG1,在兩小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段,無(wú)需還原條件。該酶對(duì)具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體(如 LALA 突變)具有活性,并啟用中級(jí) LC-MS 來(lái)表征具有突變鉸鏈的抗體的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個(gè)位點(diǎn)消化人 IgG1 (...KSCDK / THTCPPCP...),生成完整的 Fab 和 Fc 片段。FabDELLO 是一種賴(lài)氨酸特異性蛋白酶。單個(gè)消化位點(diǎn)是人 IgG1 的三維結(jié)構(gòu)的結(jié)果,使這種賴(lài)氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴(lài)氨酸處可能會(huì)出現(xiàn)額外的消化位點(diǎn)。FabDELLO在天然條件下具有活性,需要鈣離子的存在。在37°C和pH 7-8.5下獲得良好活性。FabDELLO 是從 Bdellovibrio 細(xì)菌克隆而來(lái)的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 32 kDa。山東GlySERIASIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)