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江蘇GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

來源: 發布時間:2024-04-30

在抗體藥物及核酸藥物領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力,批次生產穩定可靠、品質可控,為行業發展提供更多國產選擇。FabRICATOR(IdeS)酶是生物制藥行業中普遍使用的工具。江蘇GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

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大多數zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架,雙特異性和多特異性形式的開發正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化,這需要優化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性,它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并產生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性,通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現了完全消化,包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發中的用途。河南GingisKHANIdeS蛋白酶蛋白組學Genovis的FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達,分子量為 29 kDa,該酶含有 His 標簽。

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與肽圖譜相比,根據Genovis科學家的經驗,尤其是對于像抗體這樣的分子,許多人在常規實驗中做了太多的肽圖譜,而中級水平(Middle-level)的方法可以很好地工作。中級方法(IdeS酶切抗體)需要更少的實際操作步驟和較少的示例處理,所有這些都意味著過程中出錯的事情更少。我們的許多酶可以作為平臺方法,同樣的方法適用于絕大多數的抗體,這不是肽圖的情況下,可能需要優化整個樣品制備,LC分離,質譜設置和數據分析的每個不同的抗體分析。這些變化可能是很小的,但沒有一種適用于所有肽圖的方法。由于分析和數據分析的簡單性,中級方法非常適合自動化和高通量的工作流程。肽圖當然可以自動用于樣品制備,但高通量肽圖生成大量數據,仍然需要徹底分析。事實上,肽圖譜是一個多步驟的過程,每一個步驟都可能破壞方法,并可能導致破壞蛋白質的人工制品,很難交叉訓練給非專業人員。中級水平的方法很容易交叉訓練,我們的方法在質量控制實驗室中被成功地使用。肽圖譜是一種用于修飾分析和氨基酸確認的方法,但一旦完成了這一工作,我相信使用中級分析可以成功地更有效地完成抗體樣本的大部分工作。

Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質譜或其他分析方法分析片段。抗體消化和亞基生成的自動化使生物反應器的在線監測應用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設置的一部分,將反應器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量。該酶對具有突變鉸鏈區域的抗體(如 LALA 突變)具有活性。

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Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種獨特的酶,可在鉸鏈區域下方的特定位點消化IgG,產生均勻的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,沒有其他底物是已知的。IgG在30分鐘內消化,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,因此保留了免疫反應性。在37°C下獲得良好的活性,但也可以在室溫下使用較長的反應時間進行消解。FabRICATOR可消化人類的所有亞類以及猴子、兔子和綿羊IgG的某些亞類。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體物種,我們建議使用FabRICATORZ。FabRICATOR是從化膿性鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是IdeS的重組修飾形式,由GenovisAB開發,用于需要高標準和一致性的生物技術應用。有一種檢測FabRICATOR酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體Anti-FabRICATOR的更多信息。Genovis提供半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)。河南GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

IgASAP酶是獨特的酶促工具,可實現 IgA 的中級表征和質量控制,用于疫苗診斷的開發過程。江蘇GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學

作為免疫系統的重要組成部分,IgA在自身免疫性疾病、過敏反應、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發揮作用。在天然條件和復雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫學和研究中具有重要價值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復雜性并簡化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個顯著結構差異是鉸鏈區域。與IgA2相比,IgA1具有更長的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區域。IgASAPSub1的消化位點位于該擴展區域,使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類以三種等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和纈氨酸(V)之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸(R)殘基取代,因此這兩種同種異體型的IgA2對消化具有抗性。江蘇GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學