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重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來源: 發布時間:2024-05-09

為了讓所有實驗室都能同時快速自動消化多種抗體,Genovis的FabRICATORMagIC的設計具有靈活性,適用于一系列自動化平臺。我們在ThermoScientific?KingFisher?純化系統上優化了FabRICATORMagIC的工作流程,但它可以轉移到其他自動化平臺,如果沒有自動化,在振動臺上也能同樣出色地工作。消解后,將含有處理樣品的深孔板直接轉移到LC-MS的自動進樣器中進行快速色譜分析,或轉移到其他分析方法進行分析。FabRICATORMagIC與在消解緩沖液中添加0.05%聚山梨醇酯20兼容,以極大限度地減少自動化系統中可能發生的純粹壓力。使用KingFisher儀器處理樣品時,樣品制備非常簡單。將樣品、樹脂和緩沖液移液到指定的孔或板中,然后將板放入儀器中。設計用于FabRICATORMagIC的BindIt?協議將控制每個步驟的孵育溫度和時間。為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的、自動化,高通量的替代方法。重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質酶切產品。完整質量和肽圖譜是蛋白質表征的常用方法,我們發現,與簡單但信息有限的完整質量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優勢。通過執行中級描述,您可以生成從完整的質量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優勢。在對抗體進行完整質量分析時,很難明確地識別某些修飾。質譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠將它們定位到蛋白質上的單個結構域,這是你在完整水平上無法做到的。上海FabULOUSIdeS蛋白酶Genovis的FabRICATOR(IdeS) MagIC 以較少的用戶交互減少實驗和操作時間。

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與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發揮活性。活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。

Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對處理兔IgG感興趣,請聯系Genovis團隊,我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。 QC方法需要執行簡單,易于訓練,高度可重復,數據易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因為它適用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進行QC工作的客戶將能夠在未來的產品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。Genovis 酶產品,被世界各地的科學家使用,創新的產品形式促進了生物藥物的開發和質量控制。

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為什么客戶想在他們的工作試用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特異性(在鉸鏈下方有單個消化位點)以及它對IgG種和亞類表現出活性的事實使其成為高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大優勢是速度。在大多數IgG上,您可以在短短30分鐘內生成F(ab’)2和Fc/2片段,這一速度簡化了方法開發,并允許快速有效的中層表征,使客戶能夠在不比做完整質量實驗長太多的時間內獲得更多關于分子的信息。Genovis發現更多的緩沖液與溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息)。Genovis已經測試了PBS和150mM醋酸銨,pH7,結果良好。并且應該也適用于FabRICATORHPLC。然而,緩沖液的離子強度會影響抗體片段在FabRICATORHPLC(IdeS)色譜柱上的保留,并且IgG1亞基需要至少100-150mM鹽才能洗脫為單個窄峰。其他IgG亞類或融合蛋白可能需要對緩沖液組成進行一些優化。工藝開發和潛在生物制藥穩定性研究相關的大量樣品。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶

度拉糖肽的使用GlySERIAS酶切后,HPLC分析后,還鑒定了GLP-1肽的氧化。重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

抗體的氧化是可能影響抗體功能的關鍵質量屬性,需要密切定量和表征。它可能導致mAb的體內半衰期、功效和穩定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化產生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩健性允許在受監管的環境中監測抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法(如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白)的表征、質量控制、穩定性測試、生產監測和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個消化位點快速–在30分鐘內生成均勻的片段池實現基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質量控制可固定在即用型離心柱中重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶