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四川FabULOUSIdeS蛋白酶抗體酶切

來源: 發布時間:2024-06-17

作為免疫系統的重要組成部分,IgA在自身免疫性疾病、過敏反應、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發揮作用。在天然條件和復雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫學和研究中具有重要價值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復雜性并簡化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個顯著結構差異是鉸鏈區域。與IgA2相比,IgA1具有更長的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區域。IgASAPSub1的消化位點位于該擴展區域,使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類以三種等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和纈氨酸(V)之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸(R)殘基取代,因此這兩種同種異體型的IgA2對消化具有抗性。能夠在中級表征中并行快速自動酶解多種抗體。四川FabULOUSIdeS蛋白酶抗體酶切

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經過多年的經驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細胞、細胞基因藥物等領域的需求。其中,細胞基因藥物領域產品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產品、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、聚糖分析用酶、ADC偶聯技術、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。浙江FabALACTICAIdeS蛋白酶蛋白組學GingisKHAN用于LC-MS表征基于抗體的生物藥研究。

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與IdeS不同,度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 (GLP-1) 分子組成,它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區域。為了分別研究肽和 Fc 區域,從而鑒定結構域特異性 PTM,用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性,使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明,使用GlySERIAS進行連接子消化后,肽從Fc區域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點,這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體,其中不同數量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外,還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化,但一式三份的酶解在獲得的不同Fc/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。

樣品制備的條件可能會在樣品中誘發偽影,因此需要避免高溫和堿性pH值進行質譜分析。如果可能的話,避免多個步驟并在一鍋反應中進行消化和還原也可能是有益的。與IdeS不同,為了探索Genovis的GingisREX對離液劑和去液劑的穩定性和耐受性,在一系列試劑中測試了酶活性,并使用底物測定進行了評估。數據顯示,GingisREX在6M時耐受尿素,吐溫高達1%,但活性在0.1%時受到SDC的負面影響。該酶在 pH 值范圍為 5.0 至 9.0 時顯示出活性,在 pH 值為 6.5-8.0 之間。綜上所述,GingisREX可用于一鍋反應,以同時消化和變性6M尿素。與Genovis的IdeS不同,雙特異性 T 細胞接合器 (BiTE) 分子是一種融合蛋白療法,其中兩個 scFv 融合,形成一個雙特異性分子,其中一個 scFv 靶向細胞毒性 T 細胞,另一個靶向Ai癥抗原。該蛋白質由四個蛋白質結構域組成,兩個 scFv 均由 VL 和 VH 區域組成,總共由三個柔性 GS 連接子連接。這種蛋白質的大尺寸(54 kDa)可能對通過完整質譜法進行產品質量監測構成挑戰,因為標準MS儀器可能無法提供蛋白質的單同位素分辨率。單一酶切位點和質譜的精度確保了Fc糖基化譜檢測,用于監測批次間的一致性和其他關鍵質量屬性。

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與IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單一的消化位點是人IgG1三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現額外的消化位點。GingisKHAN需要溫和的還原條件才能具有活性,并且在37°C和pH8下獲得活性。還原劑(2mM半胱氨酸)與酶一起提供。GingisKHAN是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。該酶用于使用LC-MS表征基于抗體的生物zhiliao藥物,研究Fc聚糖分析、雙特異性抗體、親和力和親和力效應,并鑒定翻譯后修飾。幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子,留下了接近均質的Fc/2產物。福建GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

在抗體及核酸藥領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶。四川FabULOUSIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis提供凍干和固定化的FabRICATOR(IdeS),為客戶提供了許多選擇,以滿足他們的需求。 凍干形式用于高度靈活的方法開發的目的,并隨時準備使用,只需重組和添加到IgG樣本。 凍干酶的靈活性也意味著它可以應用于更高的通量和自動化的工作流程。 Genovis還提供了在瓊脂糖樹脂上固定化的酶,在隨時可用的旋轉柱中,這可以極大限度地減少在樣品中殘留的酶,這可能是有利的。 對于更多的制備應用,我們提供FabRICATOR Fab2試劑盒,這是IgG片段生成和純化的強大工具。 這包括FabRICATOR固定化柱和CaptureSelect Fc純化柱,用于亞基的親和純化。 由于FabRICATOR在非還原條件下是活性的,F(ab’)2片段保留其鏈間和鏈內二硫鍵,如果片段想用于結合研究,這一點尤為重要,因為結合效率和免疫反應性將被保留。四川FabULOUSIdeS蛋白酶抗體酶切