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IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來源: 發布時間:2024-06-28

在抗體藥物及核酸藥物領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力,批次生產穩定可靠、品質可控,為行業發展提供更多國產選擇。鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,生成的片段可用于結晶和高階(HOS)NMR研究、結合研究等。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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大多數zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架,雙特異性或多特異性形式的開發正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對 Fc 糖基化。傳統方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化,這需要優化以大限度地減少過度消化并獲得足夠的產量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE) 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgG1,以產生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數人IgG1 上也具有活性,其中鉸鏈區域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能,我們消化了不同的人IgG1抗體,并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質片段生成和強大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。青海FabULOUSIdeS蛋白酶通過高分辨率質譜進行分離和鑒定:酶解曲線和更高的序列覆蓋率。

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Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并在兩小時內生成均質的Fab和Fc片段(Genovis的IdeS在鉸鏈區下方的單個位點進行消化)。生成的片段可用于結晶和高階結構(HOS)的NMR研究、結合研究等。突變的鉸鏈區域是zhiliao性候選抗體的常見修飾,以降低效應器功能。這些突變可能會影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如,高度特異性的FabRICATOR(IdeS)消化效率對含有常見LALA突變的抗體產生負面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,能夠對具有突變鉸鏈區域的抗體進行流行的中級LC-MS分析。例如,用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab,在下鉸鏈區域具有LALA突變,并通過反相LC-MS進行分析。消化產生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段,用于中級LC-MS分析,發現產生了均相的Fc/2、輕鏈(LC)和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩健性能。

與IdeS不同,Genovis的GingisREX(RgpB)是一種精氨酸特異性蛋白酶,可消化精氨酸殘基的C末端蛋白質,包括難以與其他酶消化的Arg-Pro鍵。該酶可用于肽圖分析、從頭肽測序和翻譯后修飾分析。精氨酸殘基的特異性C-末端消化;在其他困難的精氨酸-脯氨酸序列中可靠消化;產生更長的肽-提高序列覆蓋率。GingisREX是一種半胱氨酸蛋白酶,可特異性地消化肽鍵C末端到精氨酸殘基,包括與脯氨酸相連的精氨酸。半胱氨酸是酶活性所必需的。與胰蛋白酶消化相比,可生成更長的肽,胰蛋白酶消化可以通過高分辨率質譜進行分離和鑒定。這為自下而上方法的樣品制備提供了更多選擇,以實現替代的酶解曲線和更高的序列覆蓋率。GingisREX在賴氨酸上沒有活性,通常使用Arg-C觀察到。該酶在5.0-9.0的寬pH值范圍內具有活性,它需要半胱氨酸并被鹽酸胍抑制。該酶是從牙齦卟啉單胞菌中純化的。Genovis提供的IgASAP Sub1+2 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgA1 和 IgA2m1,產生完整且均勻的 Fab 和 Fc 片段。

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與IdeS不同,Genovis的FabULOUS(SpeB)是一種半胱氨酸蛋白酶,可在來自多個不同物種和亞類的IgG的鉸鏈區域消化,產生Fab和Fc片段。人、小鼠、大鼠、山羊和綿羊的IgG被FabULOUS消化,產生Fab和Fc片段。人IgG1的主要消化位點是......KTHT...例如,制備的Fab片段可用于親和力研究、Fab糖基化研究和結構研究。對來自多個物種和亞類的IgG有活性–上鉸鏈區域的消化物;快速-在一小時內生成Fab和Fc片段;有效消化小鼠IgG1。FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達。FabULOUS的分子量為29kDa,該酶含有His標簽。有一種檢測FabRICATOR(IdeS蛋白酶)酶的方法。了解有關山羊多克隆抗體 Anti-FabRICATOR 的更多信息。云南FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis的FabULOUS來源于化膿性鏈球菌,在大腸桿菌中表達,分子量為 29 kDa,該酶含有 His 標簽。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質酶切產品。完整質量和肽圖譜是蛋白質表征的常用方法,我們發現,與簡單但信息有限的完整質量和高度復雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優勢。通過執行中級描述,您可以生成從完整的質量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優勢。在對抗體進行完整質量分析時,很難明確地識別某些修飾。質譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠將它們定位到蛋白質上的單個結構域,這是你在完整水平上無法做到的。IgGZEROIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶