一些應用(如結合研究)具有高度靈敏度,因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段。因此,Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供,可快速輕松地生成均質 F(ab')2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR (IdeS),用于制備來自多種 IgG 的 F(ab')2 和 Fc 片段(對于兔 IgG,請咨詢),而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進行處理 。 為了生成和純化完整的 F(ab')2 和 Fc/2 片段,使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗,并通過 SDS-page 進行分析。首先,在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘,然后進行短離心步驟。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F(ab')2 片段,并通過降低 pH 值,然后立即調整回中性 pH 值,一步洗脫結合的 Fc 片段。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過程大約需要 1 小時度拉糖肽的使用GlySERIAS酶切后,HPLC分析后,還鑒定了GLP-1肽的氧化。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學
當你應用像肽圖這樣的方法時,你可以從Genovis中級方法中獲得的信息量就沒有那么多了。一個主要的區別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個氨基酸。然而,中級分析比肽圖譜具有快速和簡單的巨大優勢,因為需要分析的色譜峰要少得多,數據處理任務要簡單得多。此外,在中級實驗中,手工實驗步驟要少得多,FabALACTICA(IdeS)酶切消化方法不需要針對不同的人體IgG1進行優化。一旦在氨基酸水平上進行了PTM表征,我們非常認為中級表征肽圖的一種補充方法,可以在更常規的基礎上應用。中級分析更適用于高通量或監測類型的方法,并可用于支持肽圖分析。河南GlycINATORIdeS蛋白酶人IgA1比IgA2具有更長的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區域。
樣品制備的條件可能會在樣品中誘發偽影,因此需要避免高溫和堿性pH值進行質譜分析。如果可能的話,避免多個步驟并在一鍋反應中進行消化和還原也可能是有益的。與IdeS不同,為了探索Genovis的GingisREX對離液劑和去液劑的穩定性和耐受性,在一系列試劑中測試了酶活性,并使用底物測定進行了評估。數據顯示,GingisREX在6M時耐受尿素,吐溫高達1%,但活性在0.1%時受到SDC的負面影響。該酶在 pH 值范圍為 5.0 至 9.0 時顯示出活性,在 pH 值為 6.5-8.0 之間。綜上所述,GingisREX可用于一鍋反應,以同時消化和變性6M尿素。與Genovis的IdeS不同,雙特異性 T 細胞接合器 (BiTE) 分子是一種融合蛋白療法,其中兩個 scFv 融合,形成一個雙特異性分子,其中一個 scFv 靶向細胞毒性 T 細胞,另一個靶向Ai癥抗原。該蛋白質由四個蛋白質結構域組成,兩個 scFv 均由 VL 和 VH 區域組成,總共由三個柔性 GS 連接子連接。這種蛋白質的大尺寸(54 kDa)可能對通過完整質譜法進行產品質量監測構成挑戰,因為標準MS儀器可能無法提供蛋白質的單同位素分辨率。
Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評估 mAb 的關鍵質量屬性。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,是評估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,在海報“FabALACTICA產生純和均相的mAb亞基,促進2D-NMR波譜分析”中進行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質量信號和光譜分辨率導致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結構變化、氧化和非氧化樣品之間的差異,并通過觀察原子分辨率來比較原研劑和生物仿制藥的 HOS。這正是您使用FabRICATOR(IdeS蛋白酶)可以得到的。
在抗體藥物及核酸藥物領域,倍篤生物產品線涵蓋藥物研發的全流程,主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產品牌都具有國內自研、自產能力,批次生產穩定可靠、品質可控,為行業發展提供更多國產選擇。Genovis提供FabRICATOR Fab2試劑盒,這是IgG片段生成和純化的強大工具。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學
FabRICATOR 驗證試劑盒應用:簡化QC方法驗證;批次間變異性評估的理想形式;提高批量放行檢測性能的可信度。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis提供FabRICATOR(IdeS)驗證包。三種不同批次的凍干酶,用于驗證基于FabRICATOR的分析方法。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATOR酶已成為生物制藥行業中使用的工具,用于表征用于zhiliao用途的單克隆抗體、Fc融合蛋白、ADC和生物仿制藥。每批FabRICATOR酶在釋放前都經過嚴格的酶活性、特性和純度測試。FabRICATOR驗證試劑盒由三批凍干酶組成,使方法驗證更容易。每批都附有一份分析證書。QC應用的簡化方法驗證;批次間變異性評估的理想形式;提高批量放行檢測性能的可信度。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學