對于涉及完整Fab或Fc抗體片段的應用,需要在抗體鉸鏈處進行消化。木瓜蛋白酶和 Lys-C 等傳統酶可用于生成 Fab 片段,但非特異性酶活性需要仔細優化,以極大限度地降低多個消化位點的風險。Genovis的SmartEnzymes IgG 蛋白酶 GingisKHAN 和 FabALACTICA 具有一個消化位點,可從人 IgG1 生成均質的 Fab 和 Fc 抗體片段。生成的片段可用于結晶和高階結構 (HOS) 的 NMR 研究、結合研究等。在這里,我們提出了獲得完整Fab和Fc抗體片段的不同策略。所得片段顯示 GingisKHAN 的有效消化,用于生成完整的 Fab 片段或從依那西普上的融合 TNFR 結構域中分離 Fc。由于 GingisKHAN 的特異性消化依賴于 IgG 的天然折疊,因此在變性條件下特異性受到負面影響。為了使用SDS-PAGE分析消解效率,在加入SDS上樣緩沖液之前,停止在分析樣品中加入碘乙酰胺的反應。Genovis同時提供IdeS酶的純化試劑盒。Genovis的GingisREX在6M時耐受尿素,吐溫高達1%,但活性在0.1%時受到SDC的負面影響。青海GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis提供具有低水平內Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規格:2000和5000單位,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產品配方每瓶的內Du素含量較低,2000單位小瓶的內Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,內DU素水平低;適用于靈敏的體內或基于細胞的檢測。吉林FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶為了獲得更均勻的度拉糖肽融合蛋白的消化產物。
Genovis集團由瑞典GenovisAB和美國全資子公司GenovisInc.組成。該公司在納斯達克上市。如需了解更多信息,請訪問投資者關系。Genovis的經營理念是為生物制藥和研究行業的客戶提供工具,以促進和節省開發新治療方法和診斷的時間。Genovis酶產品,稱為SmartEnzymes,被世界各地的科學家使用,創新的產品形式促進了生物藥物的開發和質量控制。通過在2020年收購QEDBioscience,產品組合已擴大到包括用于研究、生物藥物開發和診斷檢測的抗體和試劑。在官網上閱讀有關QED的更多信息Genovis研發活動的基石是客戶關系,使產品開發能夠滿足客戶需求。與專注于表征新酶、開發新工作流程和新靶點抗體的學術團體的合作同樣有價值。
與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。使用FabRICATOR(IdeS)的抗體消化的簡單性、速度和可重復性也意味著這種酶可以被用于質量控制應用。
Genovis是一家瑞典生物技術公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具,主要用于生物制藥行業和學術界。我們在全球范圍內提供創新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發、生產和質量控制。您可以在我們的網站上“Application頁面”獲得更多應用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯系我們。Genovis的GlySERIAS 是一種獨特的酶。青海GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
孵育時間為過夜(16-18小時),并且由于酶的特異性,沒有過度消化的風險。青海GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計,但在無法實現自動化的情況下,在振動臺上的表現同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析,或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發和潛在生物制藥穩定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。青海GingisREXIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶