超濾離心管的原理:根據標稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設計也較大程度降低了溶質極化造成的濾膜結垢;Chemicalbook死體積設計能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉)離心步驟而實現高效回收。超濾離心管的應用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養提取液或細胞裂解液中的大分子成分,去除反應液中的引物、接頭或分子標記,在HPLC前去除蛋白質。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾離心管可以去除混合物中的低分子量化合物,提高目標化合物的純度。溫州100K超濾離心管公司
超濾作為一種膜分離技術,普遍應用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管?1. 使用角轉子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉子內; 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉 5000 xg,旋轉 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質,在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應立即取出濃縮樣品。溫州100K超濾離心管公司使用超濾離心管時應注意避免過度旋轉造成樣品混亂并影響分離效果。
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復進行,直到雜質的濃度被充分降低。關于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質是什么?A:超濾管的膜材質為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而準, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?A:按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數量級(10倍)。
當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發生沉淀為止。使用超濾離心管時,應注意保持樣品干燥、無污染和清潔。
蛋白和多肽超濾離心管,垂直設計和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準確結果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,且簡單高效。規格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內的樣本,離心管內包含一個內置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六種不同的截留分子量中。截留分子量標識和體積刻度蝕刻在濃縮器的側面便于識別。超濾離心管還可用于制備高純度的酶、蛋白質等生物制品,以應用于不同領域的實驗室操作。遼寧再生纖維素離心管
超濾離心管適用于小到大規模的實驗室操作,并可進行批量處理以提高效率。溫州100K超濾離心管公司
在選擇過程中,應首先執行以下步驟:1考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構象改變的風險,而降低溫度可能降低濃縮效率等。2、選擇正確的膜:眾所周知,超濾沒有太多的膜選項,但您應對再生纖維素和聚醚砜(PES)材料進行測試,以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結合和較優的回收率。3、選擇合適的截留分子量,通常是靶標1/3大小的截留分子量較適合。但有時則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質、病毒、過濾應用等普遍的裝置選項;選擇合適的裝置可以有效改善結果。溫州100K超濾離心管公司
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