超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學團隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗,更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因為不同廠家的膜的截留分子量的定義不同。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細胞培養(yǎng)液、酶溶液等。北京濃縮超濾離心管選擇
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點是操作簡便、快速、高效,可同時濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過濾裝置放入離心機轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個類似的裝置來平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時,將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過濾裝置的底部插入一個移液管,通過左右掃動的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說明:為達到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。寧波蛋白分離離心管價位使用超濾離心管時要注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過度旋轉(zhuǎn)導致超濾膜損壞或溢出樣品。
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對50到500L樣本進行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴。適用于配合1.5mL試管的標準離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。
根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國產(chǎn)的離心管一般就是這幾個規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時,就要考慮進口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細的刻度,插蓋的只有一個總體的容量標示。實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀的看到樣品離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。超濾離心管通常需要在低溫條件下進行操作,以避免目標分子被破壞或失活。
超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管可以通過手動或自動方式進行操作,以適應(yīng)不同的實驗室流程要求。濃縮超濾離心管廠家
超濾離心管可用于分離和純化各種大分子化合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。北京濃縮超濾離心管選擇
實驗室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因為玻璃的離心管不能用在高速或者超速離心機上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實驗室一般會經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強酸強堿以及一些有機溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會變脆,所以在離心時不要在4℃以下。北京濃縮超濾離心管選擇