很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內的。國內外的血清,都不對進行測試(無四環素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴格,用量有限,同時每頭奶牛的產品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內由于使用普遍,血清中殘留量很高,導致國產血清質量很差,不利于細胞培養。胎牛血清常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。珠海標準血清供應商
避免產生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。珠海標準血清供應商胎牛血清有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫治作用。
胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈;又可細分為:a.高級新生牛血清:后靜置自然析出的血清;b.標準新生牛血清:c.經離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月齡小牛動脈分離血清;血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題。胎牛血清是品質較為高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較為少。
細胞培養中出現黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養細胞生長的狀態,黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態良好,與黑點出現前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;血清質量不好,反復凍融的結果;配制培養基的pH值偏高,不宜細胞生長;配制培養基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補體去活化。
除了對血清進行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質量?目測法,我們可根據血清的顏色,沉淀,澄清度等進行區分。顏色:顏色根據血清蛋白含量的不同,可表現出黃色或者紅色。進口血清質量較為好的呈現出淡黃、微紅色,較差質量呈現出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當的,由于血紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多,使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融,因此成品清澈。澄清度:進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡。國產血清絕大多數為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。珠海標準血清供應商
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。珠海標準血清供應商
細胞培養是很多下游實驗的基礎,細胞培養的好壞會直接影響后續實驗的成功和穩定,而胎牛血清作為細胞培養的主要試劑對實驗的重要性不言而喻!胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養成份,故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。提供對維持細胞指數生長的,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到醫治作用。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。珠海標準血清供應商