多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯物)刺激機體產生免疫反應,有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。多克隆抗體由于其可識別多個抗原表位、可引起沉淀反應,制備時間短,成本低的原因廣泛應用于研究和診斷方面。可以作為抗原的物質有很多種,一般的科研實驗中,經常使用的抗原有:偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。對可溶性抗原而言,為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。抗體療法是一種利用人工合成的抗體來調理疾病的新興療法。湖北IgA抗體研發制造
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質有關。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產生抗體。廣東異嗜性抗體研發團隊抗體工程可以通過改變抗體的結構和特性來提高其療效和穩定性。
隨后,經1968年和1972年的世界衛生組織和國際免疫學會聯合會討論決定,將具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白統一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構成B細胞膜表面的抗原受體。基本結構:經x線晶體衍射結構分析發現,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結構,稱為Ig單體,是構成抗體的基本單位。
多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發生交叉反應,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,并使其在體外擴增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細胞在體外的壽命較短,難以培養。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產生特異性抗體但短壽的B細胞與不產生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,獲得了可以產生單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而建立了單克隆抗體制備技術。不同的抗體可以針對不同的病原體,形成免疫記憶以應對未來的傳染。
凡能產生抗體的高等動物(包括人類),當注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進行免疫時都有著相同產生抗體的規律,即存在初次免疫應答(primary immune response)和再次免疫應答(secondary immune response)。初次免疫應答是指機體初次接觸某種抗原物質引起特異性抗體產生的過程。其特點是潛伏期長(一周以上),產生的抗體滴度(效價)低、維持的時間短,產生的抗體以IgM為主;再次免疫應答是指機體以后再次接觸同樣的抗原后所產生的抗體應答過程。其特點是產生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時問長,產生的抗體以IgG為主。人體可以通過傳染疾病或接種疫苗來產生特定的抗體。廣東異嗜性抗體研發團隊
抗體通過結合病原體的特定部位來阻止其進一步傳染人體細胞。湖北IgA抗體研發制造
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細胞可產生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發生特異性結合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區的VH、DH和JH的基因片段數分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區的Vx和JK基因片段數分別為60和5個,編碼入輕鏈V區的VX和J入基因片段數分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細胞的分化發育過程中,這些基因片段發生重排和組合,從而產生數量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細胞克隆可識別相應的抗原,產生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細胞合成無數特異性抗體的主要原因。湖北IgA抗體研發制造