脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時,可以適當延長離心時間,也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。上海超濾濃縮管哪家比較專業。常州默克2ml超濾濃縮管批發
操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現在,TFF 技術被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。浦東新區默克2ml超濾濃縮管上海超濾濃縮管代理銷售電話多少?
Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。
對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產品使用說明書。另提供AAV(腺相關***)的制備方法供參考。 去污劑因其獨特的性質,當濃度大于臨界微團濃度(Critical Micelle Concentration, CMC)時,去污劑分子會聚集形成微團而改變分子構象,這有可能會影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q?水預清洗。如果干擾仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。那么超濾濃縮管施工的優勢都有哪些呢?
通量(超濾效率)及其影響因素 超濾過程中需要在速率和回收率之間平衡以期獲得比較好的效果。濾膜的 通量的定義是流量除以面積,使用高 NMWL 濾膜可以增加通量,但同時 會降低回收率。選擇膜和裝置時需要同時考慮截留分子量和通量。而參 與影響通量的因素很多,包括: 壓力:較為稀釋的蛋白溶液或膠體懸液進行超濾時,流量隨著跨膜壓力 (TMP)的增大而增加。正壓條件下操作,如 Stirred Cell 攪拌式超濾杯, 這種因素影響較為明顯。如果極化影響***,通量會達到一個平臺,甚 至可能隨著壓力的增加而降低。超濾濃縮管的好處您了解多少呢?默克0.5ml超濾濃縮管咨詢報價
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這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果,數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標準化,數據結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。常州默克2ml超濾濃縮管批發