提供的超濾管是沒有經過去內***處理的,同時由于內***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的。可在實驗前通過先用0.5M NaOH預清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內***。關于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進行實驗,通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾濃縮管零售多少錢呢?黃浦區默克2ml超濾濃縮管訂購
濃度:當需要截留的樣品濃度很低時,通量通常不受濃度影響。操作過 程中,隨著溶質濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導致通量降低。 溫度:粗體,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率。每增加 1℃蛋白擴散率增加 3-3.5%,同時溶液粘度降低。 實踐中一般是以樣品和設備能耐受的比較高溫度來操作。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結構,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀,產生堵塞和得率損失。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結構中,形成結晶和沉淀。上海默克0.5ml超濾濃縮管聯系電話超濾濃縮管的優缺點您知道嗎?
這是一種用一步溫和的離心完成滲濾而很大程度保持蛋白活性的好方法。 為了與下游應用兼容,常常需要用透析或滲濾方法對蛋白樣品進行緩沖液置換。傳統透析方法需要時間很長,多步透析容易造成樣品丟失、損耗和失活,而且***還需要一步濃縮。新產品 Amicon? Pro 帶來了突破性的革新,需一步溫和的滲濾操作即可達到同時對樣品進行換液和濃縮的目的。 Amicon? Pro建立小量蛋白樣品純化-換液/ 脫鹽-濃縮流程 新標準 操作步驟的優化與簡化往往帶來更好的結果,數據的穩定性、可比性和高通量化隨之得以改 善,默克密理博新上市的Amicon? Pro純化超濾管創造性地將純化、換液、脫鹽和濃縮操作融為一體,減少樣品轉移損失和人為操作的繁瑣和誤差,使蛋白樣品的處理更加標準化,數據結果便于評估和比較。寶貴的小量樣本從此有了比較好的操作工具。
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節省過濾時間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時 膜截留分子量應該充分大于流過的溶質。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設備構造等。因此常常發生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的 NMWL膜和設備。雖然影響因素較多,我們通常建議截 留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時節省過濾時間。超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜。
特點與優點: 特別的反轉離心回收設計,滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數達到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設計的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫gDNA鑒定、PCR產物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,沒有死體積,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實際應用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結合率分析等等。超濾濃縮管的系列有很多種。上海默克0.5ml超濾濃縮管聯系電話
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Amicon? Ultra超濾管的膜材質為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。黃浦區默克2ml超濾濃縮管訂購