Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數細胞分泌的微小膜泡,具有脂質雙層膜結構,直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發現,但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年,人們發現這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發現點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。2015年,隨著精確醫學概念的提出,越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個新型的研究熱點,由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性,已經成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,在精確醫學發展上有著光明的前景。外泌體的提取的方式:超速離心法。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態學(電子顯微鏡技術)、粒子大小以及標志蛋白等方式實現的。江蘇外泌體PKH67
質膜的連續內陷較終導致多泡體的形成,多泡體可與細胞內的其他囊泡和細胞器交叉,從而增加了外泌體成分的多樣性。根據細胞來源的不同,細胞外囊泡,包括外泌體,可以包含細胞的許多成分,包括DNA、RNA、脂質、代謝物、胞質和細胞表面蛋白。目前產生外泌體的生理目的尚不清楚,需要進一步研究。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內環境的穩定。近來的研究也表明外泌體中特定細胞成分的功能、靶向、機制驅動的積累,提示它們在調節細胞間通訊中發揮作用。植物外泌體circRNA測序膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎,它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍。
外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質形成。它也由各種類型的脂質和蛋白質組成,這些脂質和蛋白質衍生自形成外泌體的親代細胞。根據外泌體數據庫ExoCarta的資料,目前已知約有8000種蛋白質和194種脂質與外泌體相關。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌,包括滑膜液,母乳,血液,尿液,唾液,羊水和血液中的血清,這表明它們在細胞間通訊和觸發生理反應中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發現是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質。簡而言之,它們是天然膜囊泡,將蛋白質,RNA,DNA和脂質從一個細胞攜帶到另一個細胞,從而調節受體細胞的生物功能。
眾所周知外泌體是供體細胞分泌出來的胞外囊泡,被受體細胞吸收后起到調控受體細胞功能,這篇綜述文章主要討論了外泌體的生成、生化性質以及作為藥物遞送載體的潛力。外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、肉瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不同的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構,能比較好的保護其包被的物質,且能靶向特定細胞或組織,因此是一種比較好靶向給藥系統。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等,可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。
免疫印跡或蛋白質印跡是分析外泌體較常用的方法之一,其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結合。首先對樣品進行處理將囊泡裂解并將蛋白質變性,變性后,通過SDS-PAGE分離蛋白質,然后將其轉移到硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上并暴露于針對目的抗原的抗體中。抗體特異性識別膜表面上的抗原,然后將膜暴露于第二抗體中。通過二抗的熒光標簽或與二抗偶聯的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶基團進行檢測。常用的標記蛋白為CD63、CD81、TSG101和ALIX等。但是此方法的特異性和重復性會受到所用抗體質量的限制。外泌體提取在短時間(一周之內)使用,可以放在4度保存,如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。干細胞外泌體提取試劑盒
流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。江蘇外泌體PKH67
外泌體遞送藥物的優勢:許多新的候選藥物(例如蛋白質和核酸)在體內環境中高度不穩定,對診療結果的效果提出了重大挑戰。鑒于與許多當前的納米微粒遞送系統相關的問題,外泌體作為“自然的遞送系統”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細胞產物,通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細胞的吞噬作用或降解,還可以在體內長時間循環,保持效果。其中,外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經系統是外泌體遞送藥物的一個明顯優勢。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。江蘇外泌體PKH67
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