標記的多樣化與多功能酶標儀應運而生 標記物的多樣化,是免疫技術的發展和進步的一個方面。免疫檢測標記物由本初的放射同位素,發展為安全無污染的辣根過氧化物酶(HRP)和磷酸酯酶,并進一步擴展到熒光素、稀土元素(目前主要是Eu)、上轉換等;底物溶液也對應的由酶催化下產生顏色效應的底物發展為產生光子或熒光信號,獲得更加靈敏和穩定的信號和更寬的線性范圍,并相應產生了更多檢測模式。 多種檢測模式整合在單臺儀器上,多功能酶標儀就運用而生了,可實現對吸光度、時間分辨熒光(TRF)、化學發光(Lum)及非標記檢測技術熒光偏振(FP) 、熒光強度(FI,FRET)等兩種或多種模式的檢測。此外,應用于分子互作的BRET/NANO-BIT(生物發光共振能量轉移技術)、熒光共振能量轉移技術(TR-FRET)和ALPHA等,近些年也被應用于多功能酶標儀中。而且多功能酶標儀不限于微孔板檢測,還可內置比色皿插槽。因此,酶標儀目前已成為一個廣義的定義。酶標儀即酶聯免疫檢測儀。是酶聯免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器。上海智能化酶標儀使用方法
七、雙波長評價 方法:在運用酶標儀檢測樣品時,由于溶液中的小氣泡、杯底的水紋印及劃痕、小孔杯之間透明度的差異等等,這些都是儀器測定過程中常見的干擾因素,而標本中的干擾組份(如溶血、黃道)因洗滌而對測定結果影響則較小,因此我們將文獻中的雙被長評價方法改為:取同一廠、同一批號酶標板條(每個通道2條共24孔)每孔加入200ul甲基橙溶液(吸光度調0.065~0.070A)先后于8個通道分別采用單波長(490nm)和雙波長(測定波長490nm、參比波長630/650nm)進行檢測,計算單波長和雙波長測定結果的均值、離散度,比較各組之間是否具有統計學差異以考察雙波長消除干擾因素的效果。上海智能化酶標儀使用方法全自動酶標儀主要由樣品處理系統、酶標板處理系統、測試系統和數據分析系統組成。
微孔板是一種經事先包埋用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著相應的抗原或抗體,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。 光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。 隨著檢測方式的發展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs) 酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片,只能截取特定波長進行檢測。
上海儀器設備供應商-上海儀器儀表生產商-上海精密儀器制造商-上海穩贏機電設備有限公司的酶標儀:全自動酶標儀是一種高級的生物實驗設備,主要用于進行生物酶的定性和定量分析。其主要功能是能夠自動讀取酶標板上的吸光度,以此判斷樣品的含量、活性、結構等信息。全自動酶標儀的基本原理:全自動酶標儀主要由樣品處理系統、酶標板處理系統、測試系統和數據分析系統組成。樣品處理系統可以自動加樣、混合、分配等操作;酶標板處理系統可以自動清洗、涂覆、加背景液等操作;測試系統可以自動檢測樣品的吸光度;數據分析系統則可以自動計算、分析樣品的數據,并生成圖表、報告等結果。全自動酶標儀的數據分析系統可以自動計算、分析樣品的數據,并生成圖表、報告等結果。
方法: 一、濾光片波長精度檢查及其峰值測定 方法及其衡量的標準:用高精度紫外可見分光光度計(波長精度±0.3nm)對不同波長的濾光片進行光譜掃描,檢測值與標定值之差即為濾光片波長精度,其差值越接近于零且峰值越大表示濾光片的質量越好,波長精度越高。 二、靈敏度和準確度的監測 方法:①靈敏度:配制6ug/ml重鉻酸鉀(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解),加入200ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中,以0.05mo1/L硫酸溶液作空白,于450nm(參比波長650nm)測定,其吸光度應≥0.01A。②準確度:準確配制:1mmo/L對硝基苯酚(提純品)水溶液,然后以10mmo1/L氫氧化鈉溶液25倍稀釋之,加入200ul稀釋液于小孔杯中,以10mmo1/LNaOH溶液作空白,于405nm(參比波長650nm)檢測,其吸光度應在0.4A(0.395~0.408A)左右。酶標儀通常具有自動化操作系統,能夠實現自動加樣、洗滌、檢測等功能,減少了人為操作的誤差和繁瑣性。江蘇品質酶標儀原理
酶標儀兼容微量檢測板:可進行體積為2μL或4μL,較大可支持60多個微量樣品的同時檢測。上海智能化酶標儀使用方法
酶標儀的分類 1.光吸收酶標儀:是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測,特定波長的光通過微孔板中的樣品后,光能量被吸收,而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關系,由此可以用來定性和定量的檢測,光吸收的檢測技術成熟,成本低,操作簡單,但是動態范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強,一般可見光和紫外光分別采用鎢燈及氘燈作為光源,而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換,適應不同測量波長的需求。 2.熒光酶標儀:是用來進行熒光的檢測,通過激發光柵分光后的特定波長的光照射到被熒光物質標定的樣品上后,會發出波長更長的發射光,通過發射光柵后到達檢測器,熒光的強度與樣品的濃度呈一定的比例,熒光檢測靈敏度高,可實時檢測,使用方便,檢測模式多樣,但是容易受外界干擾,激發光與發射光容易互相影響,干擾檢測。上海智能化酶標儀使用方法