擴展性檢查：可以在某些情況下由實驗室選擇或根據臨床醫生的特殊要求而使用的項目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學和炎癥細胞等相關檢查項目。提出了基因突變是導致不育和精液常規檢查異常的原因。新增了精液相關細胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內容。在精液參數異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報道指出其與精液參數正常男性的不育有關。由于與精液質量相關，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補充內容，已成為男科學基礎和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進行了描述。新增了基因和基因組測序內容。臨床上，越來越多的人意識到染色體異常[數量異常、結構異常(包括微缺失和微重復)]和基因突變是導致各種男性不育癥的基礎病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規在醫學遺傳學實驗室進行，但一些男科實驗室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響，泌尿男科醫生可能提出對精液中的趨化因子和細胞因子進行評估。本手冊納入了精液中白細胞介素檢測方法。Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質量評估設備。全自動化精子分析DAP

[臨床意義]1.若數日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常，說明精囊或前列腺有病變；若精液量減至數滴，甚至排不出，稱為無精液癥，見于生殖系統的特異性***，如結核、淋病和非特異性炎癥等。2．若精液量過多(一次超過8ml)，則精子被稀釋而相應減少，有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色，久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1．黃色或棕色膿樣精液：見于精囊炎或前列腺炎等。2．鮮紅或暗紅色血性精液：見于生殖系統的炎癥、結核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀，30分鐘內自行液化。[臨床意義]1．精液粘稠度低，似米湯樣，可因精子量減少所致，見于生殖系統炎癥。??2．液化時間過長或不液化，可抑制精子活動而影響生育，常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好，有中速運動，但波形運動的較多)以上，**后1小時內有Ⅲ級以上活動能力的精于應＞0.60。[臨床意義]如果0級(死精子，無活動能力，加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良，精子原地旋轉、擺動或抖動，運動遲緩)精子在0.40以上，常為男性不育癥的重要原因之一。南京計數精子分析VCL通過計算機圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進行識別和跟蹤計算，從而得出精子動靜態各項參數。

通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數在測試中表現出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統獲得的數值與直觀評估獲得的數值進行分析和比較在精子數量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運動精子百分率上的相關性較低］。Holt等報道了在常規實驗條件下采用五種不同的CASA系統對**參數值進行比較，其結果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數；變異系數（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數的重要性。輔助生殖技術（授精IVF）的發展使檢測精子質量與各參數間的關系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。

精子手工計數原理及操作方法1.原理：將精液用適當的稀釋液作一定量稀釋后，混勻注入計數池內計數，再算出每毫升精液中精子數。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規程》）1).于小試管內加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數板的計數池內,靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數。3.計算1).如每個**中方格內精子少于10個,應計數所有25個中方格內的精子數。2).如每個**中方格內精子在10~40個,應計10個中方格內的精子數。3).如每個**中方格內精子多于40個,應計數5個中方格內的精子數。公式：精子數=計數結果/計數中方格×25×1/計數池高度×20×103/ml=計數結果/計數中方格×1/計數池高度×5×103/mlIVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動識別和計算精子的各項參數，減少了人工操作的誤差。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規方法。這一部分包括了非常專業化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內容。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂，用戶無需具備專業知識也能夠輕松上手使用。馬精子分析DAP

不同品牌CASA分析的結果差異較大，因此，更高效精確的精液質量檢測系統對促進男科學發展具有重要的意義。全自動化精子分析DAP

1.基本檢查：是確定精液變量穩定的常規方法，不僅是男科實驗室，任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數依然推薦使用改良Neubauer血細胞計數板的方法，但計數的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優先方法，伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數據表明，鑒別快速前向運動精子非常重要。因此，關于精子活力分級，第6版手冊建議恢復到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調，精子形態學評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(ART)結局的預后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正常”形態率的判斷，則要求必須由訓練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數20%的精液，應單獨計算并在報告中注明；全自動化精子分析DAP