外源基因導入真核細胞的方法有很多種,如磷酸鈣轉染法、DEAE-葡聚糖轉染法、脂質體法、電穿孔法、顯微注射法等。2×HEPES緩沖鹽溶液主要用于磷酸鈣轉染,其主要成分為HEPES,HEPES是一種非離子兩性緩沖劑,能有效控制pH在范圍,尤其在pH具有較好的緩沖能力,終濃度一般為mmol/L,培養液內含mmol/LHEPES 即可達到較好的緩沖能力。Leagene HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細胞轉染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其**適pH值為,經過濾除菌處理。影響磷酸鈣轉染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在細胞上停留的時間、休克時間。Leagene 2xHeBS要求DNA濃度在為宜,Hela、BALB等細胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等細胞可以通過甘油、DMSO進行熱休克處理以提高轉染效率。AVT穩定供應注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽。云南現貨HEPES需求
羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(HEPES)4-羥乙基哌嗪乙磺酸(簡稱HEPES),分子式為C8H18N2O4S。分子結構中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),又含有兩個堿性叔胺氮,所以呈現兩性,可用來配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中,再用氫氧化鈉調節pH至適當值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對其pH值影響不大,因此能夠較長時間維持穩定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現較強的酸性,易給出H+;兩個叔胺氮各含有一個孤對電子,呈現堿性,可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對。而且,單個HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內鹽,即兩性離子。在水溶液中,HEPES分子、內鹽以及磺酸基和叔胺各自產生的離子之間因H+或OH-的轉移而能夠相互轉化建立平衡關系,憑借該平衡關系的移動來抵御外來酸堿的影響來調節溶液pH值穩定,所以具有緩沖作用,其平衡轉化關系見下圖。黑龍江輔料HEPES藥用采購注射級,低內***、國產化穩定供應、高性價比注射級HEPES找AVT!
緩沖溶液的作用原理是通過互為酸堿緩沖對之間的酸堿平衡移動來抵御外加少量酸、堿以及稀釋作用的。緩沖溶液自身pH值可根據公式進行計算,緩沖溶液的緩沖能力可以用緩沖容量進行標度。但是,任何緩沖溶液的緩沖能力都是有限的,因為當大量的H+或OH-進入溶液時,緩沖溶液中的緩沖對將被大量消耗,抗堿、抗酸的作用也隨之減弱直到消失。實際應用中各緩沖對組成的緩沖溶液都有比較好的緩沖范圍。在實際生產過程中,如果選擇的緩沖溶液緩沖范圍與預期偏差較大,使用大量強酸/強堿或許可以強行將溶液pH調至預期值,但此時溶液體系的緩沖容量已消耗殆盡,無法起到應有的緩沖保護效果,對制劑產品后續的加工及長期儲存穩定性造成影響。
HEPES(4-2-羥乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量為238.31,化學名:4-羥乙基哌口秦乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。HEPES是制備緩沖液的有機物質,為非離子兩性緩沖液,在pH 7.2 - 7.4范圍內具有很好的緩沖能力。 ***用于細胞培養,為了維持穩定的生理pH值,20下的pKa為7.55。 HEPES用于保護冷凍酶溶液免受冷凍誘導的pH變化的影響。 考慮到HEPES的光毒性(暴露于環境光會產生過氧化氫),該緩沖劑配置溶液后,保存在黑暗的環境中,以便在后續實驗中正常工作。GMP條件下生產注射級HEPES。
HEPES緩沖溶液具有對細胞無毒性、不易穿過生物膜、不參與細胞內生化過程等特點,所以在生化實驗中具有***的應用,如可用于開放式細胞生長、細胞的長期觀察、RNA或DNA提取試劑盒中。其次,相關研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯反應。另外,HEPES緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關實驗表明,HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。具體應用方面,如鹽酸伊立替康脂質體注射液(Onivyde)。艾偉拓國內艾偉拓穩定供貨注射級HEPES!四川備案登記號HEPES批量
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儲存方法:HEPES緩沖液在2-8℃下可保存1年。注意事項:HEPES緩沖液運輸時需要加冰袋。但儲存時避免冷凍,否則會有鹽類物質析出。N-三(羥甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一種兩性離子緩沖液,名字由Tris和glycine衍生而來,結構類似于Tris,但是高濃度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”緩沖液之一,**初開發用于提供葉綠體反應的緩沖體系。Tricine的有效pH緩沖范圍為7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做電泳緩沖液,以及用來重懸細胞沉淀。Tricine具有低負電荷和高離子強度的特性,非常適用于電泳分離1~100kDa的低分子量蛋白。基于螢火蟲熒光素酶的ATP分析實驗中,比較10種常見的緩沖液,Tricine(25mM)表現出比較好的檢測效果。另外,在自由基誘導的膜損傷實驗中,Tricine還是一種有效的羥自由基清除劑。作者:泰安格林化工鏈接:云南現貨HEPES需求
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