生化實驗室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統(tǒng)，生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結果的因素并不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖液都可能產生不需要的化學反應。硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉淀出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。三羥甲基氨基甲烷：它可以和重金屬一起作用，但在有些系統(tǒng)中也起抑制作用。其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris緩沖液，4℃時是8.4，37℃時是7.4，因此，4℃配制的緩沖液在37℃進行測量時，其氫離子濃度就增加了10倍。在pH7.5以下，其緩沖能力極為不理想。國內AVT穩(wěn)定供貨注射級HEPES。海南高純HEPES生產廠家

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（5）緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊：①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大，一般現(xiàn)用現(xiàn)配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺，分子結構中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應，是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的緩沖液。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好，但磷酸根具有一定的絡合能力會抑制一些與金屬離子有關的生化反應。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑，但其有多種生物學效應，如：縮短血液凝固時間、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等，在一定程度上會影響患者身體狀態(tài)，使用時應需注意。

關于HEPES緩沖溶液的配制，不同的文獻資料有不同的說法。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M的NaOH水溶液調節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml，于4攝氏度保存。二、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液調節(jié)pH值，***定容。三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5MNaOH調節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可。國內AVT注射用HEPES已登記？

(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液（lmol/L），使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L（100x）hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用戶0mmkBe注射級，低內***、國產化穩(wěn)定供應、高性價比注射級HEPES找艾偉拓！吉林HEPES現(xiàn)貨

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注射級氨丁三醇緩沖液優(yōu)點如下：1.Tris堿的堿性較強，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液，應用范圍廣；2.Tris緩沖液對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀；3.Tris在水中溶解度高，對很多酶的反應是惰性的；4.Tris緩沖能力高，在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力；5.Tris緩沖劑應用***，在生物化學、分子生物學、體外診斷、化妝品、涂料等領域發(fā)揮重要作用。注射級HEPES！海南高純HEPES生產廠家

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