原代肝細(xì)胞,作為肝臟研究和藥物開發(fā)領(lǐng)域的關(guān)鍵元素,具有不可替代的重要性。這些從新鮮肝臟組織中分離出來的細(xì)胞,保留了肝臟細(xì)胞的原始特征和生理功能,為科學(xué)家們深入探究肝臟的奧秘提供了寶貴的實(shí)驗(yàn)材料。原代肝細(xì)胞不僅能夠模擬肝臟在體內(nèi)的代謝過程,還能對(duì)藥物的毒性和療效進(jìn)行準(zhǔn)確評(píng)估,是肝臟疾病研究和藥物篩選的有力工具。在肝臟生物學(xué)研究中,原代肝細(xì)胞發(fā)揮著舉足輕重的作用。它們能夠幫助研究人員了解肝臟細(xì)胞的分化、增殖和凋亡等基本生命過程。通過對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)和觀察,科學(xué)家可以揭示肝臟在正常生理狀態(tài)下的細(xì)胞機(jī)制,為理解肝臟的功能和調(diào)節(jié)提供了微觀視角。此外,原代肝細(xì)胞還被用于研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制,如肝炎、肝...
在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),是否需要添加血清?在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常需要添加血清。血清是一種含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的液體,可以提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子,促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。血清中含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以為細(xì)胞提供能量和營(yíng)養(yǎng),促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。此外,血清中還含有多種生長(zhǎng)因子,如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等,可以促進(jìn)肝細(xì)胞的分化和增殖。然而,血清中也含有一些雜質(zhì)和微生物,可能會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能產(chǎn)生不利影響。因此,在使用血清時(shí),需要選擇高質(zhì)量的血清,并對(duì)血清進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制和檢測(cè),以確保血清的質(zhì)量和安全性。此外,在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),也可以使用...
原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型,它們是從健康的肝臟組織中分離出來的P0代細(xì)胞,具有非常高的生物學(xué)活性和生長(zhǎng)能力。原代肝細(xì)胞在肝臟疾病的研究中扮演著非常重要的角色,因?yàn)樗鼈兛梢阅M肝臟組織的生理和病理狀態(tài),從而幫助研究人員更好地理解肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制和治療方法。立沃生物的原代肝細(xì)胞是經(jīng)過嚴(yán)格篩選和培養(yǎng)的,具有非常高的純度和活性。原代肝細(xì)胞可以應(yīng)用于多種研究領(lǐng)域,如肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制、藥物代謝和毒理學(xué)等方面。立沃生物原代肝細(xì)胞具有以下特點(diǎn):1.高純度:原代肝細(xì)胞經(jīng)過多次篩選和培養(yǎng),具有非常高的純度和活性,可以滿足各種研究需求。2.高活性:原代肝細(xì)胞具有非常高的生物學(xué)活性,可以模擬肝臟組織的生理...
細(xì)胞密度差異會(huì)影響原代肝細(xì)胞的形態(tài)。通常情況下,肝細(xì)胞在高密度狀態(tài)下會(huì)呈現(xiàn)出多邊形的形狀,但是在低密度狀態(tài)下,它們的形態(tài)就會(huì)變得多樣化。有些肝細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出梭形的形狀,有些則會(huì)呈現(xiàn)出五花八門的形態(tài),甚至可能會(huì)出現(xiàn)其他奇怪的形狀。這是因?yàn)樵诘兔芏葼顟B(tài)下,肝細(xì)胞之間的距離較遠(yuǎn),它們之間的相互作用力也會(huì)減弱,從而導(dǎo)致它們的形態(tài)發(fā)生變化。這種變化不只是形態(tài)上的變化,還可能會(huì)影響到肝細(xì)胞的功能和代謝活性。因此,在進(jìn)行肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),密度的控制是非常重要的,需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要進(jìn)行調(diào)整,以保證肝細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和發(fā)育。原代肝細(xì)胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病,從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展,為其攻克提供可能...
保存溫度是影響原代肝細(xì)胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來說,原代肝細(xì)胞的保存溫度為4℃,但是在這種溫度下,細(xì)胞的代謝活動(dòng)仍然會(huì)繼續(xù)進(jìn)行,導(dǎo)致細(xì)胞的壽命有限。因此,為了延長(zhǎng)原代肝細(xì)胞的壽命,可以將其保存在低溫下,如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細(xì)胞的代謝活動(dòng),延長(zhǎng)細(xì)胞的壽命,但是在保存過程中需要注意加入凍存液,防止細(xì)胞凍結(jié)損傷。 原代肝細(xì)胞的運(yùn)輸也是一個(gè)重要的問題。在運(yùn)輸過程中,細(xì)胞可能會(huì)受到振動(dòng)、溫度變化、氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,導(dǎo)致細(xì)胞失活或功能受損。為了保證細(xì)胞的完整性和功能性,可以采用液氮運(yùn)輸?shù)姆绞剑丛诘蜏叵逻\(yùn)輸細(xì)胞。在運(yùn)輸前給細(xì)胞提供充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣,也可...
原代肝細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)有許多獨(dú)特的形態(tài)特征。原代肝細(xì)胞是指從新鮮肝臟組織中分離出來的一種細(xì)胞類型,呈多邊形或多角形形狀,大小約為20-30微米。原代肝細(xì)胞具有明顯的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),核小而高亮,細(xì)胞核呈圓形或橢圓形,也有雙核情況存在。原代肝細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細(xì)胞器和細(xì)胞骨架,濃稠且顏色較深。此外,原代肝細(xì)胞表面具有許多微絨毛和微細(xì)突起,這些結(jié)構(gòu)有助于細(xì)胞之間的黏附和交流。同時(shí),原代肝細(xì)胞具有高度的代謝活性和生物合成能力,能夠合成和分泌多種生物活性物質(zhì),如蛋白質(zhì)、hormone、細(xì)胞因子等。這些獨(dú)特的形態(tài)特征使得原代肝細(xì)胞成為研究肝臟生理和病理過程的重要模型細(xì)胞。原代肝細(xì)胞衍生的Organoi...
原代肝細(xì)胞是簡(jiǎn)單有效的生物體外模型。相比于其他類型誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝臟細(xì)胞或是cancer細(xì)胞系,原代肝細(xì)胞在造模的同時(shí)不需要復(fù)雜的對(duì)細(xì)胞進(jìn)行重編程,以及誘導(dǎo)分化,可以更方便更快速的進(jìn)行高通量藥理研究。此外和另外兩種方式相比,原代肝細(xì)胞能夠更準(zhǔn)確的反應(yīng)體內(nèi)的真實(shí)情況,有數(shù)據(jù)表明,原代肝細(xì)胞比iPSC誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝細(xì)胞內(nèi)的堿基取代少數(shù)倍,同時(shí)這些細(xì)胞還保留了捐獻(xiàn)者的特有特征,是較為理想的研究模型。另一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于,原代肝細(xì)胞衍生的Organoid可以提供獨(dú)特的肝毒模型,因?yàn)樵?xì)胞保留了患者特有的I期II期藥物代謝情況。原代細(xì)胞不僅擁有捐贈(zèng)者特有的生理特性,同時(shí)也具備其他兩種肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)...
在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如何檢測(cè)污染情況?在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,檢測(cè)污染情況是非常重要的,可以通過以下幾種方法進(jìn)行檢測(cè):1.肉眼觀察:通過肉眼觀察培養(yǎng)物的外觀、顏色、透明度等是否異常,如果出現(xiàn)渾濁、變色、沉淀等異常情況,可能是污染所致。2.顯微鏡觀察:使用顯微鏡觀察培養(yǎng)物中的細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量、分布等是否異常,如果出現(xiàn)細(xì)胞變形、破裂、死亡等異常情況,可能是污染所致。3.細(xì)菌培養(yǎng):將培養(yǎng)物接種到細(xì)菌培養(yǎng)基中,觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng),如果有細(xì)菌生長(zhǎng),說明培養(yǎng)物受到了細(xì)菌污染。:使用PCR技術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)物中的細(xì)菌、病毒等微生物的DNA,如果檢測(cè)到DNA存在,說明培養(yǎng)物受到了污染。總之,在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)...
在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如何避免污染?在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,避免污染是非常重要的,以下是一些避免細(xì)胞污染的方法:1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作:在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前,需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無菌處理,并在操作過程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無菌技術(shù):在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要使用無菌技術(shù),例如使用無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌手套等,以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔:培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備,并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng):在培養(yǎng)過程中,需要控制人員流動(dòng),盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室,以避免污染。5.使用...
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留酶水平和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;6...
在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),選擇合適的培養(yǎng)條件非常重要,以下是一些選擇培養(yǎng)條件的建議:1.培養(yǎng)基:選擇適合肝細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,如William'sE培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基等。不同的培養(yǎng)基成分可能會(huì)影響肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。2.溫度和濕度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)溫度通常為37°C,濕度為95%左右。在培養(yǎng)過程中,需要保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度和濕度穩(wěn)定。3.氧氣含量:肝細(xì)胞需要充足的氧氣供應(yīng),因此需要選擇透氣性好的培養(yǎng)容器,并保持培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣含量充足。4.細(xì)胞密度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來確定。一般來說,肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度不宜過高,以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。5.細(xì)胞因子:在培養(yǎng)過程中,...
原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型是一種常用的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P停糜谘芯扛渭?xì)胞的生物學(xué)特性和功能。原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型具有許多優(yōu)點(diǎn)。首先,該模型可以提供一定量的原代肝細(xì)胞,使研究人員能夠進(jìn)行大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)研究。其次,該模型提供了一個(gè)穩(wěn)定的環(huán)境,使研究人員能夠更好地控制原代細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化,以及研究肝細(xì)胞在不同條件下的反應(yīng)和功能。此外,該模型還提供了一種簡(jiǎn)單、快速和經(jīng)濟(jì)的方法,用于評(píng)估藥物的毒性和療效,以及研究原代肝細(xì)胞在不同疾病狀態(tài)下的反應(yīng)和功能。原代肝細(xì)胞的2D培養(yǎng)模型也存在一些限制。首先,該模型只能提供有限的原代肝細(xì)胞數(shù)量,因?yàn)樵渭?xì)胞在體外的壽命較短,容易失去其生物學(xué)特性和功能。其次,該模型無法完...
原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長(zhǎng)的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)時(shí)可以呈單個(gè)細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán),胞體為圓形。其優(yōu)點(diǎn)是在培養(yǎng)液中生長(zhǎng),生存空間大,允許長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng),便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細(xì)胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細(xì)胞相互接觸后可抑制細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),因此細(xì)胞不會(huì)相互重疊于其上面生長(zhǎng)。細(xì)胞生長(zhǎng)、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營(yíng)養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到一定密度后,由于營(yíng)養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細(xì)胞分裂停止,稱為密度抑制。 當(dāng)肝細(xì)胞被分離后,可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞在開始的4~6h內(nèi)細(xì)...
原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中去除endotoxin是十分重要的。原代肝細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,但在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞可能會(huì)受到endotoxin的污染,這會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 endotoxin是一種由細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì),可以引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,endotoxin可能來自于培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)器具或細(xì)胞本身。因此,需要采取一些措施來去除endotoxin。 一種常用的方法是使用endotoxin去除劑,例如聚陽(yáng)離子樹脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。這些去除劑可以吸附endotoxin,從而...
原代肝細(xì)胞是一種來源于肝臟組織的細(xì)胞,具有很高的酶水平和重現(xiàn)性,是進(jìn)行肝臟相關(guān)研究的重要材料。我們公司的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù),能夠保持細(xì)胞的原始性,具有很高的可再生性和穩(wěn)定性,可以廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的研究和藥物篩選。我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用關(guān)鍵技術(shù)的培養(yǎng)方法,能夠保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化,同時(shí)不會(huì)影響細(xì)胞的穩(wěn)定性和功能。我們的產(chǎn)品具有以下特點(diǎn):1.高質(zhì)量:我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品來源于健康的人體肝臟組織,具有很高的生物學(xué)活性和穩(wěn)定性,可以保證研究結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。2.易于培養(yǎng):我們的原代肝細(xì)胞產(chǎn)品采用較新的培養(yǎng)技術(shù),能夠保持細(xì)胞的原始性,同時(shí)不需要復(fù)雜的培養(yǎng)條件,可以方便地進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)...
不同物種的原代肝細(xì)胞在貼壁時(shí)間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細(xì)胞可能在培養(yǎng)基中需1個(gè)小時(shí)開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時(shí)左右。這是由于不同物種的細(xì)胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),貼壁時(shí)間是一個(gè)重要的指標(biāo)。一般來說,原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細(xì)胞的代謝活性和功能會(huì)得到提高,因此貼壁時(shí)間越短,細(xì)胞的生物學(xué)活性就越高。但是,如果貼壁時(shí)間過短,細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整。 另外,原代肝細(xì)胞的貼壁能力也與細(xì)胞的新鮮程度有關(guān)。新鮮分離的原代肝細(xì)胞一般需要4-6小時(shí)才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細(xì)胞則需要更長(zhǎng)的時(shí)間。因此,在進(jìn)行原代肝細(xì)...
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留酶水平和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;6...
原代肝細(xì)胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養(yǎng)板上,原代肝細(xì)胞可貼壁培養(yǎng),同樣高密度培養(yǎng)有助于肝細(xì)胞分化狀態(tài)的維持。但原代肝細(xì)胞在體外的培養(yǎng)時(shí)間較短,人原代肝細(xì)胞在體外培養(yǎng)3天內(nèi)可保持乙肝病毒易感性,培養(yǎng)兩周發(fā)生明顯的去分化以及細(xì)胞凋亡情況。北京大學(xué)鄧宏魁教授發(fā)表在《科學(xué)》上的數(shù)據(jù)顯示,通過添加5種小分子化合物抑制原代肝細(xì)胞去分化進(jìn)程,可在體外長(zhǎng)期維持肝細(xì)胞的分化狀態(tài),維持時(shí)間長(zhǎng)達(dá)八周。那為什么原代肝細(xì)胞在體外容易去分化呢?肝細(xì)胞在體外缺乏了肝細(xì)胞與肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的交流,又或者缺乏了肝臟的三維結(jié)構(gòu)。基于以上問題與分析,我在碩士期間開展了肝細(xì)胞與肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)工作。結(jié)果顯示...
原代肝細(xì)胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外,也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細(xì)胞毒性等...
不同物種的原代肝細(xì)胞在貼壁時(shí)間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細(xì)胞可能在培養(yǎng)基中需1個(gè)小時(shí)開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時(shí)左右。這是由于不同物種的細(xì)胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),貼壁時(shí)間是一個(gè)重要的指標(biāo)。一般來說,原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細(xì)胞的代謝活性和功能會(huì)得到提高,因此貼壁時(shí)間越短,細(xì)胞的生物學(xué)活性就越高。但是,如果貼壁時(shí)間過短,細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整。 另外,原代肝細(xì)胞的貼壁能力也與細(xì)胞的新鮮程度有關(guān)。新鮮分離的原代肝細(xì)胞一般需要4-6小時(shí)才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細(xì)胞則需要更長(zhǎng)的時(shí)間。因此,在進(jìn)行原代肝細(xì)...
原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留酶水平和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;6...
肝臟是人體內(nèi)重要的organ之一,它不僅是人體的化學(xué)工廠,還是藥物代謝的重要organ。藥物在體內(nèi)的代謝過程中,肝臟扮演著至關(guān)重要的角色。因此,研究肝臟的代謝功能對(duì)于藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究具有重要的意義。 在體外藥物代謝研究中,肝臟是常用的模型之一。常用的體外模型包括肝微粒體、肝S9、肝胞質(zhì)液、原代肝細(xì)胞、肝組織切片和重組人代謝酶等。其中,原代肝細(xì)胞因具有較好的體外試驗(yàn)重現(xiàn)性,基本維持了肝臟的代謝功能,特別是較好的保留了與體內(nèi)一致的酶水平,成為了體外藥物試驗(yàn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”,廣泛應(yīng)用于藥物代謝與毒理學(xué)研究中。 原代肝細(xì)胞的研究對(duì)于藥物代謝和毒理學(xué)研究具有重要的意義。它可以模擬體內(nèi)肝臟的代謝過程,研究...
原代肝細(xì)胞由于自身良好的體外重現(xiàn)性,以及保持了高度的酶水平,在藥物篩選中發(fā)揮著重要作用。原代肝細(xì)胞可以用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)、藥物毒性評(píng)估和藥物相互作用研究等方面。原代肝細(xì)胞可以更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)藥物的代謝和毒性,因此在藥物研發(fā)領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用前景。 原代肝細(xì)胞還可以用于研究肝病的發(fā)病機(jī)制、診斷和therapeutic method。例如,可以利用原代肝細(xì)胞研究肝細(xì)胞cancer的發(fā)生機(jī)制,探索新的therapeutic method。此外,原代肝細(xì)胞還可以用于研究肝炎病毒的原理和therapeutic method,為肝炎的攻克提供新的思路和方法。 除了在藥物篩選和肝病研究中的應(yīng)用,原代肝細(xì)胞在生...
近年來,隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,原代肝細(xì)胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用的作用越來越重要,取得了一系列重要進(jìn)展。首先,原代肝細(xì)胞在肝臟發(fā)育和肝臟再生方面的研究中發(fā)揮了重要作用。研究表明,原代肝細(xì)胞可以分化為多種肝細(xì)胞類型,如肝細(xì)胞、膽管細(xì)胞和星形細(xì)胞等,從而為肝臟發(fā)育和再生提供了重要的細(xì)胞來源。此外,原代肝細(xì)胞還可以通過體外培養(yǎng)和移植等方法促進(jìn)肝臟再生和修復(fù)。其次,原代肝細(xì)胞在肝臟疾病的研究中也有重要應(yīng)用。研究表明,原代肝細(xì)胞可以模擬肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展過程,如肝纖維化、livercancer等,從而為疾病的機(jī)制研究和新藥開發(fā)提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀4送猓渭?xì)胞還可以用于篩選和評(píng)價(jià)肝...
原代肝細(xì)胞的體外擴(kuò)增不是一件容易的事。原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型,具有豐富的酶系和多種特異性功能,因此被大量用于生物化學(xué)、實(shí)驗(yàn)性肝損傷、藥代動(dòng)力學(xué)、毒理學(xué)和cancer等研究。然而,這些細(xì)胞在體外的存活能力非常有限,所以分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細(xì)胞并不是一件容易的事情。 分離高質(zhì)量的原代肝細(xì)胞,需要采用一系列復(fù)雜的技術(shù)和方法。首先,需要選擇合適的動(dòng)物模型,以獲得足夠數(shù)量的肝組織。然后,需要對(duì)肝組織進(jìn)行消化和分離,通常使用的方法包括機(jī)械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過程中,需要注意避免對(duì)細(xì)胞的損傷,以保證細(xì)胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細(xì)胞也需要按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培育...
原代肝細(xì)胞還廣泛應(yīng)用于構(gòu)建移植人肝組織的小鼠模型。為了研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和開發(fā)新的解決方法,科學(xué)家們開發(fā)了小鼠模型來模擬人類肝臟疾病。其中,將人原代肝細(xì)胞移植于鼠可建立移植人肝組織的高度免疫缺陷的小鼠模型。這種模型可以用于研究肝炎、livercancer、肝纖維化等肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制和治療方法。常用的小鼠模型為HBV三聚體小鼠模型。該模型首先對(duì)BALB/c鼠進(jìn)行全身致命性照射以去除正常小鼠的免疫系統(tǒng),然后用SCID小鼠骨髓細(xì)胞進(jìn)行免疫重構(gòu),然后將已經(jīng)受HBV影響的人原代肝細(xì)胞移植到鼠肝內(nèi)。大約80%的鼠出現(xiàn)病毒血癥,這意味著該模型可以用于研究HBV的發(fā)病機(jī)制和克服方法。盡管血漿中病毒滴度比...
原代肝細(xì)胞是藥物早期研究的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞模型。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí),原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者...
原代肝細(xì)胞是藥物早期研究的金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞模型。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細(xì)胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測(cè)結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時(shí),原代肝細(xì)胞的角色更為重要。 人原代肝細(xì)胞是重要的體外模型。人原代肝細(xì)胞在較大程度上保留了細(xì)胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細(xì)胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細(xì)胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者...
原代肝細(xì)胞的來源供體來源很多。鑒于人原代肝細(xì)胞存在數(shù)量稀缺和倫理道德等問題,研究人員嘗試從動(dòng)物肝臟中分離原代肝細(xì)胞,用來體外培養(yǎng)并進(jìn)行研究。使用較多的是嚙齒動(dòng)物,還有一些哺乳動(dòng)物和魚類。目前常用的供體品系有樹鼩、大小鼠、豬、新西蘭兔、比格犬、貓、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚等。 原代肝細(xì)胞除了供體品系不同以外,也會(huì)根據(jù)細(xì)胞來源的供體數(shù),分為單供體和多供體。供體數(shù)的選擇主要取決于實(shí)驗(yàn)的研究目的。 原代肝細(xì)胞的應(yīng)用場(chǎng)景也很多。隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:①探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;②預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用;③研究藥物的細(xì)胞毒性等...
在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如何避免污染?在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中,避免污染是非常重要的,以下是一些避免細(xì)胞污染的方法:1.嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作:在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)前,需要對(duì)所有設(shè)備和材料進(jìn)行嚴(yán)格的無菌處理,并在操作過程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,避免細(xì)菌和其他微生物的污染。2.使用無菌技術(shù):在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要使用無菌技術(shù),例如使用無菌培養(yǎng)皿、無菌吸管、無菌手套等,以避免污染。3.保持培養(yǎng)環(huán)境清潔:培養(yǎng)環(huán)境的清潔度對(duì)原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)非常重要。需要定期清潔培養(yǎng)室和培養(yǎng)設(shè)備,并保持室內(nèi)通風(fēng)良好。4.控制人員流動(dòng):在培養(yǎng)過程中,需要控制人員流動(dòng),盡量減少人員進(jìn)出培養(yǎng)室,以避免污染。5.使用...