超聲溶栓是一種用于溶解***引起的血管血栓(血栓)的***方法。***過程是利用MNB造影劑與超聲聯合產生空化效應,以破壞纖維蛋白網。Ling等人利用EDC/NHS偶聯cRGD肽,利用溶劑乳液蒸發法制備了環arg - gys - asp (cRGD)靶向PLG...
氣泡將改變血管壁,允許藥物劑外滲,通過將微泡與顆粒和染料共同注射,可評估血管外藥物遞送的可行性。微泡與釓共注射后MRI顯示釓外反酸。或者,藥物可以被納入微泡中,并通過在病變的給藥血管中選擇性地破裂微泡來增加局部給藥。然而,這些方法并不能消除流動血液中釋放的藥物...
超聲微泡的大小差異影響超聲微泡的藥代動力學、病變部位靶向、內吞過程和細胞攝取。人體生物系統對不同顆粒的反應不同,小于8μm的氣泡具有模擬紅細胞循環的優點,從而促進其擴散到血管和***間的循環中。除此之外,氣泡的大小不應超過8μm,因為它可能導致并發癥,如血流中...
轉染時通常推薦使用血清減少或無血清培養基,包括陽離子轉染試劑,如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。這種轉染活動需要形成陽離子脂質體-DNA復合物,這需要帶正電的脂質體分子和帶負電的核酸之間的相互作用。因此,血清中負電...
氣泡在靶區域的聚集和藥物的釋放主要依賴于各種外源性和內源性刺激,并不是由特異性的主動靶向引起的。EPR和血管生成相關表面受體的(過)表達是**血管的關鍵特征。因此,epr介導的被動靶向和基于配體的主動靶向引起了相當大的關注。Kunjachan等人使用RGD和n...
PLL(聚L -賴氨酸)是生理條件下帶正電的多氨基酸,當鏈長超過20個殘基時,它可以與質粒DNA結合并凝聚成致密顆粒。研究人員發現,配體在PLL上的共價附著可通過受體介導的途徑***增強內吞作用。例如,涎腺樣體(ASOR)是涎腺糖蛋白受體的配體,在肝細胞上表達...
在7種轉染試劑(DAC-30、DC-30、Lipofectin、LipofectAMINEPLUS、Effectene、FuGene 6和superect)中,FuGene 6轉染HASMCs和α-10 SMCs的效率比較高。在這兩種細胞系中,superect...
轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對照相比,至少經歷一次凍融循環后,HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細胞系的轉染效率更高,且細胞活力...
肌內注射脂質體不能引起強烈的毒性反應,這與肺內或靜脈注射途徑的情況不同。幾項體內研究表明,pDNA載體的肺內遞送是促炎th1樣細胞因子的產生和隨后浸潤細胞涌入肺區域的原因。在任何情況下,陽離子脂質本身不會引起免疫反應,而且這種效果不是由于pDNA制備中存在內*...
納米顆粒,由于其在DNA轉運到細胞中的保護能力,在不久的將來可以用作轉基因的非病毒載體。通過將納米粒子與許多不同的配體和化合物連接來修飾納米粒子,有助于改善它們在細胞內的運輸。將納米顆粒靶向到細胞內的特定位置,配子和胚胎,可以通過磁轉染來實現。盡管與市售的用于...
質子泵抑制劑可以通過基于從一個供體蛋白到受體蛋白的能量轉移的物理測量來評估,也可以通過化學測量來評估,在化學測量中,表達的蛋白質與另一種蛋白質之間的相互作用活性可以在刺激時通過適當的報告系統來檢測。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發光共振能量轉移(BRET)...
***個靶向微泡心臟成像研究是在急性缺血再灌注損傷模型中進行的,該模型在狗身上注射了涂有磷脂酰絲氨酸的白細胞靶向微泡,磷脂酰絲氨酸是顆粒吞噬攝取的標記物。這些微泡針對的是在血管中積累且尚未外滲的白細胞:在再灌注后1小時觀察到**靶向的造影劑在梗死區積累。在心肌...
影響物理轉染或機械轉染效率的因素在很大程度上取決于這些方法的基本原理。例如,電穿孔技術依賴于電場來增加宿主細胞膜的通透性,以內化外來核酸。因此,電穿孔過程中的電壓和持續時間是決定電穿孔成功與否的重要因素。施加高壓的長時間電穿孔可能會導致細胞損傷并降低轉染效率。...
轉染是將外來核酸傳遞到真核細胞中以修飾宿主細胞的遺傳組成的過程。在過去的30年里,轉染因其廣泛應用于研究疾病的細胞過程和分子機制而越來越受歡迎。了解疾病的分子途徑,可以發現可能用于疾病診斷和預后的特定生物標志物。此外,轉染可以作為基因***中的策略之一,用于*...
deae-葡聚糖是一種化學修飾的葡聚糖類似物。通過用二乙基氨基乙基修飾,右旋糖酐鏈的酰胺化很容易被質子化,這使得它可以自組裝成帶負電荷核酸的納米顆粒。deae -葡聚糖是***個用于核酸轉染的陽離子聚合物。早在20世紀50年代,它就極大地增強了脊髓灰質炎病毒和...
納米顆粒,由于其在DNA轉運到細胞中的保護能力,在不久的將來可以用作轉基因的非病毒載體。通過將納米粒子與許多不同的配體和化合物連接來修飾納米粒子,有助于改善它們在細胞內的運輸。將納米顆粒靶向到細胞內的特定位置,配子和胚胎,可以通過磁轉染來實現。盡管與市售的用于...
目前,有3家微泡廠家生產的產品可用于心臟病學應用,分別是Optison(GE Healthcare,Milwaukee,WI,),Definity(Lantheus Medical Imaging,Billerica,MA,E)和SonoVue(BraccoS...
在腺病毒載體或脂質體的全身遞送后,轉基因表達相對短暫。靜脈注射脂叢的肺表達比給藥后第1天和第2天觀察到的比較大表達量每周減少約1log。造成這種現象的機制可能有以下幾種:(a)產生針對外源基因產物的新***抗體,(b)細胞因子介導的啟動子關閉,(c)通過凋亡、...
在轉染實驗中使用對照對于確定所使用的轉染試劑和核酸的效果和效率至關重要。通常,質粒轉染和寡核苷酸轉染實驗都需要陽性對照、陰性對照、未轉染對照和模擬轉染對照。陽性對照是先前已被證明對轉染實驗產生已知影響的DNA或RNA,例如影響特定下游遺傳靶點的表達。在轉染工作...
超聲微泡有效地產生反向散射超聲,增強對比度,以便將目標部位(血管)與周圍組織區分開來。它還可以比較大限度地減少噪聲和背景信號。超聲微泡的聲學特性產生成像信號,由美國成像儀器檢測。使用超聲微泡進行診斷的頻率范圍約為2-18 MHz。共振頻率與超聲微泡的尺寸成反比...
質子泵抑制劑可以通過基于從一個供體蛋白到受體蛋白的能量轉移的物理測量來評估,也可以通過化學測量來評估,在化學測量中,表達的蛋白質與另一種蛋白質之間的相互作用活性可以在刺激時通過適當的報告系統來檢測。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發光共振能量轉移(BRET)...
納米顆粒在疫苗遞送中往往表現出***的佐劑作用。陽離子聚合物,包括PEI、聚賴氨酸、陽離子葡聚糖和陽離子明膠,已經有報道顯示出對Th1反應的強烈刺激,其特征是誘導CD4(+)T細胞增殖和th1相關細胞因子的分泌。此外,陽離子聚合物強烈抑制LPS誘導的巨噬細胞分...
內皮素(CD105)是轉化生長因子的受體,是一種增殖相關的低氧誘導蛋白,在血管生成內皮細胞上高度表達。使用99mTc-labeled單克隆抗體靶向內啡肽的免疫掃描顯示,**中大量攝取內啡肽。**近,已經描述了一種將內啡肽特異性單克隆抗體偶聯到微泡的新方法。通過...
隨著寡核苷酸生物合成產業的發展,不同類型的修飾寡核苷酸也被引入市場,以提高小RNA寡核苷酸轉染的效率。其中一種是通過化學修飾來提高其與靶標和阻斷外切酶活性的結合親和力的agomirs和antagomirs。agomir是一種人工修飾的雙鏈miRNA模擬物,旨在...
超聲輔助轉染涉及在宿主細胞膜上制造微小的孔,以促進核酸(包括DNA和RNA)的傳遞。與前一種策略類似,超聲照射的暴露時間、脈沖數和密度也被報道與轉染效率成比例相關,直至達到閾值。超過耐受極限,細胞存活率和轉染效率可能會下降。同樣,增加核酸的數量也可以提高超聲輔...
轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對照相比,至少經歷一次凍融循環后,HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細胞系的轉染效率更高,且細胞活力...
超聲照射聯合納米微泡的生物學效應。超聲給藥技術是基于細胞穿孔的生物物理過程,超聲結合納米微泡和這個過程被稱為超聲穿孔。與其他納米粒子相比,納米微泡在超聲能量照射下具有“塌縮”的特殊性質,導致納米微泡內爆,改變細胞膜的通透性。當超聲能量充分增加時,就會發生“超聲...
化學轉染的效率在很大程度上取決于幾個因素,如使用的試劑類型、靶細胞的來源和性質,以及選擇的比較好DNA與試劑比例。慢病毒等病毒載體能夠攜帶大尺寸的核酸,并將其靶標傳遞給非分裂細胞和分裂細胞,因此在基因***中非常有用。有幾個因素已被證明可能影響病毒轉導的效率,...
共轉染是將一種以上類型的核酸引入真核細胞的過程。組合的一些例子包括多個質粒DNA ,siRNA和質粒DNA ,以及多個miRNAs進入同一個細胞。通常,多質粒DNA共轉染的目的是將一種以上的外源基因導入宿主細胞。其應用之一是生產由幾種質粒DNA成分組成的合成病...
超聲聯合納米微泡進行核酸輸送超聲聯合納米微泡進行DNA傳遞。不考慮超聲穿孔現象,建議采用US與帶核酸的微泡相互作用來提高傳輸效率。這種策略也可能有助于遺傳物質的位點特異性釋放,從而減少非共振組織轉染。通過納米微泡轉移基因已經采用了幾種技術,從基因的并發管理到納...