什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響,可以通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,影響細胞生長,當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分,很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。研究表明,酚紅可以模擬固醇類的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。常見的培養(yǎng)基包括LB培養(yǎng)基、TSB培養(yǎng)基等。IsoSensitest 肉湯
bFGF是一個肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對滋養(yǎng)細胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關(guān)的基因表達。Thomson 等認為,像其他體外培養(yǎng)的人體細胞一樣,hES 細胞要求 bFGF 的存在以促進增殖。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),由53個氨基組成的活細胞,藉由刺激表皮細胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,達到修補增生肌膚表層細胞,據(jù)說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點是能夠促進細胞的增殖分化。所以加入它們都是促進細胞增殖的。改良R2A瓊脂常見的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基,YPD培養(yǎng)基,M9培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)基等。
1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。
合成培養(yǎng)基(synthetic medium) 由已知化學成分的營養(yǎng)物質(zhì)組成的培養(yǎng)基。根據(jù)微生物對營養(yǎng)要求的不同,可完全由無機鹽或化合物組成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、維生素等,其組成成分已知,只要嚴格操作,各批次間質(zhì)量可做到穩(wěn)定一致。此培養(yǎng)基可用來檢測某種營養(yǎng)物或藥物對微生物代謝的影響。組織細胞培養(yǎng)液均屬合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的成本較高,其價格相當于同類天然培養(yǎng)基的幾倍以至于幾十倍。只含幾種無機鹽的合成培養(yǎng)基,只適用于自養(yǎng)菌的培養(yǎng),如培養(yǎng)亞硝化細菌、氧化硫桿菌等的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基大部分成分為已知化學結(jié)構(gòu)的營養(yǎng)物質(zhì),其中的個別或少數(shù)成分為未明化學成分的必須營養(yǎng)物,成為半合成培養(yǎng)基,如百日咳菌苗生產(chǎn)用的水解酪素培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備的質(zhì)量和配方對于細胞和微生物的生長、分化和培養(yǎng)效果具有至關(guān)重要的作用。
培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是,在微生物生長繁殖和代謝過程中,由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對培養(yǎng)基pH條件進行控制,往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性,KH2PO4溶液呈酸性,兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。雜質(zhì)會影響培養(yǎng)基的成分,因此制備培養(yǎng)基時需要進行滅菌。酒香酵母瓊脂基礎(chǔ)
牛肉精蛋白胨培養(yǎng)基是常用的富營養(yǎng)培養(yǎng)基,適用于快速生長的微生物。IsoSensitest 肉湯
是一家長年生產(chǎn)經(jīng)營各種培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶的綜合性公司。公司于2012-11-29成立,位于寶安公路4997號2號樓5樓。人杰地靈,資源豐富,交通便捷。目前主營產(chǎn)品是培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶,公司現(xiàn)已擁有完善的基礎(chǔ)設(shè)施,先進的生產(chǎn)工藝,配套的生產(chǎn)設(shè)備,齊全的檢測儀器。公司培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶產(chǎn)品適用于化工、生物、染料、冶金、稀土、冶煉、機械、電力、電子、環(huán)保、紡織、釀造、食品、航空、給水、排水等行業(yè)。公司培養(yǎng)基,菌種,標準品,酶產(chǎn)品銷往江蘇、上海、浙江、福建、安徽、江西、山東、山西、河北、河南、北京、天津、遼寧、吉林、黑龍江、內(nèi)蒙、寧夏、陜西、新疆、青海、湖南、湖北、重慶、四川、貴州、云南、廣東、廣西、海南等省市和自治區(qū)。IsoSensitest 肉湯
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