作為時下的熱點技術,數字PCR是將核酸樣品分配到大量單獨、平行的微反應單元(nL,納升級別)中,使得每個反應單元中盡可能含有1個模板分子,并在此基礎上進行擴增、檢測和分布統計,從而實現靶標分子的比較 計數。(圖:數字PCR技術原理)根據微反應單元的不同形式,數字PCR產品可分為微板式、微滴式和芯片式等。目前,市場上主要的數字PCR產品主要是基于微滴式和芯片式,如Bio-Rad公司的QX200微滴式系統和ThermoFisher公司的QuantStudio系統等。與一、二代PCR技術相比,數字PCR具有很多優勢:一是特異性、靈敏性均有顯著提高;二是在不依賴內參和標準曲線的前提下,可直接得到比較 量化指標;三是微反應單元相互獨立、封閉,避免了PCR抑制劑及不同核酸分子擴增產物間的相互干擾,準確度和可重復性較高。Drop-off數字PCR檢測方法的**主要優勢是能夠能夠在一個反應中檢測到基因組序列范圍短的同源基因突變。數字PCR油滴制造
基于微滴的QX100dPCR儀,利用油包水技術,將樣品平均分配到20000個微滴油包水中,利用微滴分析儀對微滴進行分析。2012年RainDance公司推出了RainDropdPCR儀,在高壓氣體驅動下,將每個標準反應體系分割成包含100萬至1000萬個皮升級別微滴的反應乳液。數字PCR就形成了2大派別,芯片式和微滴式。不論是哪種數字PCR,其原理都是有限稀釋,終點PCR和泊松分布。將含有核酸模板的標準PCR反應體系,平均分配成幾萬個PCR反應,分配到芯片或微滴中,使每個反應中盡可能含有一個模板分子,進行單分子模板PCR反應,通過讀取熒光信號的有或無進行計數,經過統計學泊松分布的校準進行定量。美國國產數字PCR解決方案dPCR可直接溯源SI國際單位制摩爾,適合單一、雙重及多重轉基因標準物質研究,一次可識別不同的轉基因區域。
二項式分布是一個離散概率分布,它給出了m次試驗中k次成功的可能性,每次試驗的概率為p,例如當擲骰子時,二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數字PCR的情況中,投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區中,當目標落在選定的分區中時,就是成功。如果有n個分區,并且分區過程是完全隨機的,則目標出現在所選分區中的概率為1/n。該試驗重復m次,樣品中的每個分子一次。更多關于PCR的相關信息,歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。
基于數字PCR技術平臺,塔歌生物成功地開發了胎兒染色體非整倍體(T21,T18和T13)無創產前篩查試劑盒(數字PCR-NIPT),并已完成數百例臨床樣本驗證。數字PCR-NIPT的陽性檢出率和NGS相似,且成本接近血清學,可以在上述應急策略中取代血清學作為靈敏度和特異性更高的初篩方法,以有效提高陽性檢出率,降低需要復篩的假陽性樣本數和節省總的篩查成本。數字PCR應用前景廣闊,可用于病原微生物檢測、基因檢測、無創產前篩查、測序結果驗證等領域。但目前,大多數醫院采購的數字PCR儀器是用于科研層面,在臨床應用上仍處于起步階段,未得到普遍應用。檢測結果部分為陽性,部分為陰性,之后進行分子數統計,不需做標曲。
盡管我國dPCR行業起步較晚,但在國家鼓勵醫療器械創新的大背景下,以及精細醫療和個性化用藥等需求推動下,dPCR成為了近年廣受關注的熱點領域,保持著穩定快速的增長。近年來國內誕生了如領航基因、新羿生物、銳訊生物、科維思、永諾生物、泛生子、思納福醫療等企業,開始與國外企業同臺競技。從市場角度看,北美依然是dPCR比較大的主導市場,其次是亞洲和歐洲。由于性疾病和的高發病率以及患者對這些疾病的早期診斷意識的提高,亞太地區將成為dPCR增長速度快的市場。伯樂、凱杰、賽默飛、羅氏、因美納等公司紛紛通過收購、投資等方式布局dPCR業務。經過PCR循環之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。數字PCR儀器
通過“儀器+試劑”相互配合的方式,打出了數字PCR檢測的“組合拳”。數字PCR油滴制造
企業宗旨:成為數字PCR的,更好地服務于體外診斷行業,讓檢測更簡單!企業價值觀:用戶,質量為本;潛力而為,主動開拓;高效執行,負責到底。發展歷程:2016年,企業成立2017年,數字PCR系統研制成功2018年,產品線成熟2019年,生產線建成“讓檢測,更簡單”。臻準生物誠摯邀請您蒞臨展會現場,洽談合作、共贏未來!作為華南地區備受舉薦的專業平臺,BTE始終以昂首積極的姿態迎接數萬專業人士,攜手生物技術行業從業者共同探討行業發展新機遇。多年來,BTE始終時刻探索業界風向,吸納行業前沿資源,不忘宗旨,銳意開拓,正圍繞粵港澳大灣區生物行業產業群的協同發展交流與融合打造一個高水平科技創新載體和平臺。數字PCR油滴制造
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