培養基的性能測試:1.外觀控制:制備好的培養基應有相應的顏色,一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化,是否蒸發/脫水。2.污染控制:從每批制備好的培養基中選取部分進行污染測試(無菌試驗),確定無微生物生長方可使用。3.性能測試:(1)測試菌株選擇:測試菌株是具有其表示種的穩定特性并能有效證明實驗室特定培養基較佳性能的一套菌株。(3)半定量測試方法(改進的劃線法接種法)。(4)定性測試方法(平板接種觀察法)。用接種環取測試菌培養物,在測試培養基表面劃平行直線。培養基制備器都是微處理器控制的,而且滅菌之后保持的溫度是可以預設的。新疆瓊脂培養基制備器
在制備培養基時,通常要考慮以下因素:1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統由于毒性小、成本低、對培養物有營養作用,因此比其他緩沖系統用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基,可通過測定滲透壓防止3.粘度培養基的粘度主要受血清含量的影響,在多數情況下,對細胞生長沒有什么影響。在攪拌條件下,用羧甲基纖維素增加培養基的粘度,可減輕細胞損害。這對在低血清濃度或無血清下條件下培養細胞顯得尤為重要。上海培養基消毒 培養基制備器培養基根據培養功能可分為基礎培養基、選擇培養基、加富培養基、鑒別培養基等。
牛肉膏蛋白胨液體培養基(又稱營養肉湯,用于培養細菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中,于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用。化學分類:天然培養基指一類利用動、植物或微生物體包括其提取物制成的培養基。如牛肉膏蛋白胨培養基、麥芽汁培養基等。組合培養基又稱為合成培養基或綜合培養基,是一類按微生物的營養要求精確設計后用多種高純化學試劑配制成的培養基。如葡萄糖銨鹽培養基、淀粉硝酸鹽培養基等。半組合培養基指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養基。例如,馬鈴薯蔗糖培養基。
培養基制備的九個步驟關注要點:步驟一:稱取數量:用1/100的電子天平稱出培養基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應培養基需要各成分的數量,然后用電子天平準確稱取重量。步驟二:培養基溶化:將培養基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養基中不含瓊脂,則不需要對培養基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三:調培養基pH:雖然培養基中含有緩沖物質,可以盡量使培養基的pH值保持在標準范圍內,但如果配制的培養基不能要求,則必須進行必要的調整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。步驟四:培養基過濾:如果對配制的培養基沒有特殊要求,這一步可以省略。步驟五:培養基分裝:準備好的培養基根據用途不同分為燒瓶、試管等容器,分裝試管量大采用自動分液器,分裝試管量小,可以用漏斗分液。確定這批培養基的較終pH值。步驟六:培養基滅菌處理:分裝完成的培養基應馬上滅菌。制備培養基的操作要點:固體培養基在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。
天然培養基中血清主要作用:提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。培養基制備器功能強大的加熱器,能夠迅速加熱。新疆瓊脂培養基制備器
培養基制備器試管塞不要塞得太緊(使用硅膠塞的時候),勿使用橡皮塞。新疆瓊脂培養基制備器
培養基的實驗室制備:―般要求:正確制備培養基是微生物檢驗的好基礎步驟之一,使用脫水培養基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規范和生產廠商提供的使用說明。培養基的不正確制備會導致培養基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養基制備培養基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。新疆瓊脂培養基制備器
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