C)大腸埃希菌++--產氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗對腸桿菌屬的鑒別試驗傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗-/+++++++---尿素酶試驗--+--+乳糖發酵試驗----++在培養基中加入指示劑或某種化學物質**不需要的**生長,利于需要的**分離,這種培養基稱為選擇性培養基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍等。美藍是氧化還原指示劑。例如,在培養基內加入青霉素可**革蘭陽性**,而利于革蘭陰性**的生長;如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽性**生長,又能**許多革蘭陰性**生長,但傷寒沙門菌卻能在這個培養基上生長出具有棕色環的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗中一種常用的選擇性培養基。大腸埃希菌在SS培養基上,因發酵乳糖而產酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發酵乳糖也不產生硫化氧。F12培養基確保了實驗結果的一致性和可靠性。寧夏RPMI1640培養基進貨價
生產上一般采用冷水噴淋冷卻,冷卻到40-50℃后,輸送到預先已經**過的罐內。(四)、間歇**與連續**的比較1、歇**的***和缺點***是設備要求低,不需另外設置加熱、冷卻裝置;操作要求低,適于手動操作,適合于小批量生產規模;適合于含有大量固體物質的培養基的**。缺點是培養基的營養物質損失較多,**后培養基的質量下降;需進行反復的加熱和冷卻,能耗較高;不適合于大規模生產過程的**;發酵罐的利用率較低。2、連續**的***和缺點***是**溫度高,可減少培養基中營養物質的損失;操作條件恒定,**質量穩定;易于實現管道化和自控操作;避免了復的加熱和冷卻,提高了熱的利用率;發酵設備利用率高。缺點是對設備的要求高,需另外設置加熱、冷卻裝置;操作較麻煩;染菌的機會較多;不適合于含大量固體物料的**;對蒸汽的要求高。由此可見,無論在理論上或者在實踐上,與間歇**過程相比,連續**的***十分明顯。因此,連續**越來越多地被用培養基的**。廣西RPMI1640培養基包括什么MEM培養基在藥物篩選中有重要作用。
維持15-20分鐘,可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**,如普通培養基、生理鹽水、手術敷料等。(二)下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗證方法高壓蒸氣**器使物品**后達到無菌要求,這是**實驗中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實驗成敗的**基礎**關鍵的首要步驟。除少數培養基只需加熱溶解,不需高壓**外,大部分培養基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養基**不徹底,直接關系到對**的無菌試驗結果。因此必須認真對高壓**器進行**效果的驗證。為此我們提供了進行**效果驗證的一個簡易可行的方法。1.試驗材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點溫度計。2.方法與結果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片(以下簡稱菌片)用無菌鑷子放人密封試管中?;瘜W指示卡和留點溫度計放入敞口試管中。以上兩種試管各準備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層,則需放10處。
又能使培養基的破壞降低至比較低的工藝條件。許多實驗研究結果表明,培養基在高溫**的過程中,其營養成分的破壞在很大程度上可以用一級反應來描述其反應速度:式中—表示營養成分破環的速率,C:表示營養成分的濃度K':為反應速度常數,1/s,應速度常數K'與溫度的關系,可以使用阿累尼烏斯公式表示之:K'=A'exp-△E'/RT……(1)式中——:反應速度常數,1/S:反應的活化能(J/mol)R:氣體常數,*J/mol*kT:反應的***溫度,k同樣,**過程中的反應速度常數也可以用下式表示出:K=A×exp[-E/RT]……(2)(1)、(2)式可以改寫成下列形式:lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……(3)lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……(4)(3)(4)的意義是指:反應的溫度從T1升高到T2,其反應的速度常數分別從k,1增加到k,2;k1增加到k2;培養基的**過程實際上是營養成分破壞、菌體死亡的兩個平行性反應,對于平行性反應,反應溫度的提高,其兩個平行性反應的速度常數都增加,但增加的幅度(大?。﹨s不同,其比值可以表示為:lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)實驗證明:營養成分為破壞的反應的活化能E的值為E,=—*103J/mol;而菌體死亡的活化能E芽孢:E=418*103J/mol。無血清培養基為細胞培養提供了純凈的背景。
1/2ms生長培養基的培養結果為:中雙11號油菜種子在1/2ms生長培養基上的萌發率為100%,培養9d的幼苗,表現為植株健壯、平均株高為,葉色濃綠,莖稈粗壯、平均莖中粗為,根系發達、平均根數為(>)、平均主根長為。如圖3所示。培養實例3和對比培養例3的培養結果比較:中雙11號油菜種子在1/2cs生長培養基和1/2ms生長培養基上的萌發率均為100%;在相同條件下培養9d時,與1/2ms生長培養基相比,1/2cs生長培養基中的幼苗長勢更佳,其株高、根的數目優于1/2ms生長培養基,莖粗及平均主根長度與1/2ms生長培養基相近。如圖3所示。培養實例4:馬鈴薯無菌苗培養生長培養基配制:1/2cs基本培養基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l,用超純水溶解,。1/2cs基本培養基的成分及用量如表1所示。培養方法:以克新18號馬鈴薯為例,將配制好的1/2cs生長培養基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養盒中,選擇生長旺盛的馬鈴薯脫毒苗,于無菌環境下,根據實際需要,用手術剪刀剪取約1cm長的至少帶有1個葉芽的莖端或莖段,用彎頭鑷子將其1/3-1/2長度垂直插入培養基中;于溫度22-23℃、濕度50-70%、光照強度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時間14h、黑暗時間10h)條件下培養。減血清培養基提高了實驗結果的可靠性。寧夏RPMI1640培養基進貨價
MEM培養基含有必要的氨基酸和維生素。寧夏RPMI1640培養基進貨價
愈傷**誘導率為100%。如圖6所示。對比培養例6:將cs基本培養基替換為ms基本培養基,其余完全同培養實例6,ms基本培養基的成分及用量如表1所示。ms誘導培養基的誘導結果為:本氏***葉片愈傷**誘導時,培養15-18d的葉片略微增厚,在葉片四周產生較少的淡綠色愈傷**,愈傷**誘導率為90%,在愈傷**團塊上產生的嫩綠色不定芽數量較少;本氏***根愈傷**誘導時,培養9-11d在切口處產生大量淡黃色致密的愈傷**,愈傷**誘導率為100%。如圖6所示。培養實例6和對比培養例6的誘導結果比較:用上述方法進行本氏***葉片愈傷**誘導時,cs誘導培養基愈傷**誘導率為100%,而ms誘導培養基的誘導率*為90%,在所述相同培養條件下,與ms誘導培養基相比,cs誘導培養基可更快誘導出大量致密的葉片愈傷**、產生更多的不定芽;用上述方法進行本氏***根愈傷**誘導時,cs誘導培養基與ms誘導培養基誘導出的根愈傷**形態相近,兩種培養基的根愈傷**誘導率均為100%。如圖6所示。培養實例7:水稻成熟胚愈傷**誘導(1)水稻種子消毒及篩選:a、選種:以秈稻縉恢10號為例,將水稻種子晾曬干燥后于4℃下長期保存,挑選籽粒飽滿、大小基本一致的水稻種子,用剪刀從種子中部剪開,去除谷殼。寧夏RPMI1640培養基進貨價